SEPARAÇÃO DE PIGMENTOS DE FOLHAS VERDES POR CROMATOGRAFIA EM CAMADA DELGADA DE SÍLICA GEL (CCD)
- Aprender a preparar o extrato e aplicar a amostra na placa de sílica gel;
- Entender sobre Cromatografia em Camada Delgada (CCD) e seus cálculos de Rf (Fator de Retenção);
- Identificar as substâncias no cromatograma.
INTRODUÇÃO
A cromatografia é um método físico-químico de separação. A cromatografia em camada delgada (CCD) um método moderno que ocupa um lugar de destaque devido a sua facilidade em efetuar separação, identificação e quantificação das espécies químicas. A CCD está fundamentada na migração diferencial dos componentes de uma mistura, que ocorre devido a diferentes interações, entre duas fases imiscíveis, a fase móvel e a fase estacionária. Esta técnica foi praticamente ignorada até a década de 30, quando foi redescoberta. A partir daí, diversos trabalhos na área possibilitaram seu aperfeiçoamento e, em conjunto com os avanços tecnológicos, levaram-na a um elevado grau de sofisticação, o qual resultou no seu grande potencial de aplicação em muitas áreas.
A cromatografia pode ser utilizada para a identificação de compostos, por comparação com padrões previamente existentes, para a purificação de compostos, separando-se as substâncias indesejáveis e para a separação dos componentes de uma mistura.
PROCEDIMENTO EXPERIMENTAL
A – Preparação do extrato Pequenos pedaços de couve foram colocados em um gral onde foram adicionados 50 mL de acetona. A couve foi triturada com um pistilo em solução até a obtenção de um líquido verde, para ser utilizado no processo.
B – Preparação da cuba A cuba foi preparada colocando em seu interior uma tira de papel filtro de 4cmx5cm e 5,0 mL de hexano e acetato de etila (9:1). A cuba foi deixada em repouso até que ocorresse a completa saturação.
C – Aplicação da amostra na placa Com o auxílio de um capilar, foram aplicadas três porções da solução de pigmentos sobre uma placa de sílica (2,5 cm x 7,5cm) a 1,0 cm de uma das extremidades. A placa de sílica ficou em repouso até o