Separação da enzima invertase, na qual são unidas pela ligação glicosídica. Fazendo o processo de invertase e separando as enzimas em glicose e frutose.
A invertase catalisa a hidrólise da sacarose no seus monómeros constituintes. Neste modo, na atividade laboratorial, procede à caracteriza a cinética da invertase a partir do estudo do efeito da concentração de sacarose na atividade da enzima.
Na atividade enzimática pode ser avaliada por vários modos, um exemplos que pode ser citado é base na atividade molar, ou seja o número de mols de um certo substrato transformado por mol de enzimas por unidade de tempo, ou por unidade enzimática, que é a quantidade da enzima que catalisada na transformação de substrato por minuto, a 25º, nas condições ótimas de ph e concentração do substrato. Assim podem obter gráficos substrato transformado em função de tempo.
Enzima Invertase
2. OBJETIVO
Separação da enzima invertase, na qual são unidas pela ligação glicosídica. Fazendo o processo de invertase e separando as enzimas em glicose e frutose.
3. MATERIAIS E EQUIPAMENTOS
3.1 Materiais
4 tubos de ensaio;
Pipeta de 1 ml;
Luvas;
3.2 Reagentes
Solução tampão;
Sacarose;
Enzima invertase;
3,5 dinitrosalicitato (3,5 DNS);
Tampão acetato pH 4,7;
Água destilada;
3.3 Equipamentos
Banho Maria;
Espectrofotômetro;
4. PROCEDIMENTO EXPERIMENTAL
Separou-se três tubos de ensaio e marcou com 3, 5 e 9 correspondendo aos valores de pH 3, 5 e 9, respectivamente. Colocou em cada um destes tubos 1 ml de solução tampão com o valor do pH correspondendo ao número marcado no tubo. Após a adicionou a solução tampão, adicionar em cada um deles 0,5 ml de solução de sacarose 0,2 mol/L e 0,8 ml de água destilada. Adicionar 0,2 ml da enzima invertase em cada um dos tubos, agitar levemente e levar todos os tubos em banho - maria a 37 C. Deixou a enzima agir durante 5 minutos, retirar os tubos do banho – maria e adicionar a cada tubo 1 ml de solução de 3,5 dinitrosalicilato (3,5 DNS). Após colocou-se o 3,5 DNS em todos os tubos, prepara um tubo denominado Branco, com os reagentes adicionados na seguinte