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TECNICAS SOROLOGICAS: Diagnosticam doenças infecciosas;
Definem estados e fases da doença;
Fazem prognostico.
As técnicas sorológicas estão baseadas na capacidade dos anticorpos em reconhecer antígenos em solução ou sobre superfícies celulares nas suas conformações naturais.
Afinidade é a força de ligação entre antígeno e a anticorpo.
Técnicas de precipitação: adição do antígeno e o soro teste, gera uma curva de precipitação.
Se o resultado for:
1/16 normal;
1/32 marca doença;
1/16 Cutoff (reação cruzada).
Hemaglutinação: reação que detecta apenas anticorpos, se coagular resultado é positivo, se não coagular resultado é negativo.
Método Elisa: O método utilizado para realizar o teste se baseia na interação anticorpo-antígeno. Normalmente é usada uma placa de superfície inerte com poços onde serão adsorvidos os antigenos de interesse juntamente com um tampão de carbonato(processo conhecido como sensibilização). Depois é realizada uma lavagem com PBS. Posteriormente é feito o bloqueio com PBS Tween com 10% de soro de cabra ou com BSA para que esta ocupe os poços livres (sítios inespecíficos que podem gerar resultados falso positivo ou negativo). Novamente é feita a lavagem. A superfície é então tratada com solução de anticorpo primário - sabendo-se que exista uma quantidade maior de anticorpo do que a proteína - específico para a proteína de interesse e este vai se ligar a ela . A superfície é lavada novamente para retirar os anticorpos primários que não foram incorporados em nenhuma proteína. Em seguida o produto é tratado com anticorpos secundários que possuem uma enzima acoplada que irá produzir uma substância corada e que se constitui de um anticorpo para o anticorpo primário. A superfície é lavada novamente para a retirada do anticorpo secundário que não se ligou ao anticorpo primário. Adiciona-se o substrato de ligação para a enzima produzir a substância corada e, assim, medindo-se a intensidade da cor da superfície, pode-se