relatorio de aulas praticas hematologia

TECNICA DE COOMBS DIRETO E INDIRETO
Fundamento
As imunoglobulinas como outras proteínas, podem ser imunogênicas quando utilizadas para imunizar indivíduos de outras espécies. A maioria das anti-imunoglobulinas geradas desta maneira reconhecem as regiões conservadas de todos os anticorpos de mesma classe. Os anticorpos anti-imunoglobulinas foram inicialmente desenvolvidos por Robin Coombs para estudar a anemia hemolítica do recém-nascido e o teste para esta doença é denominado de Teste de Coombs. Os dois testes de Coombs são: teste de Coombs direto e teste de Coombs indireto. O teste de Coombs direto é usado no diagnóstico de doenças auto-imunes e doença hemolítica do recém-nascido. Ele detecta anticorpos ligados à superfície das hemácias. O teste de Coombs indireto é usado em exames pré-natais de mulheres e em exames de sangue antes de transfusões sanguíneas. Ele detecta anticorpos contra hemácias que estão presentes livres no plasma sanguíneo do paciente.
Materiais e Métodos
• Amostras de suspensão de hemácias;
• Amostra de soro;
• Soro de Coombs;
• Solução fisiológica;
• Pipeta de 500 µL;
• Pipeta de 1000 µL;
• Tubo de ensaio;
• Centrifuga.

Técnica Direta

Neste teste anticorpos maternos que atravessaram a placenta podem ser detectados ligados nas hemácias Rh positivas do bebê. Para isso as hemácias do bebê são coletadas, lavadas para remoção de anticorpos não ligados, e simplesmente incubadas com anti-imunoglobulina humana. O teste é denominado de Coombs Direto pois a aglutinação presente vai indicar a presença dos anticorpos anti-Rh ligados nas hemácias do bebê.

Procedimento

Em um tubo foi preparado à suspensão das hemácias em 5%, colocou 2 gotas desta suspensão em um tubo, em seguida, levado a centrifuga 3000 rpm durante 1 minuto, foi lavado a suspensão por três vezes. Em seguida adicionamos 2 gotas do soro de Coombs e levamos novamente a centrifuga a 1000 rpm durante 15 seg. E por fim fizemos a