Relatorio bilirrubina

Universidade de Itaúna
Faculdade de Farmácia
Bioquímica Clínica

Bilirrubina

Marcelo Vasconcelos Parreira

Itaúna
2014
INTRODUÇÃO

A bilirrubina é o principal produto do metabolismo do heme da hemoglobina. Cerca de 70% a 80% da bilirrubina são provenientes da destruição dos eritrócitos, hemácias, velhos(as), 15% de fontes hepáticas, e o restante é proveniente da destruição de hemácias defeituosas na medula óssea e nos citocromos.
Existem portanto dois tipos de bilirrubina circulantes - a não conjugada, também chamada de bilirrubina indireta, e a conjugada, chamada de bilirrubina direta. No entanto, existe um terceiro tipo de bilirrubina, chamada de bilirrubina delta, do tipo conjugada de reação rápida e ligada à albumina permanentemente por uma ligação covalente. Pelas técnicas tradicionais, a bilirrubina delta era incluída nos resultados da bilirrubina direta (conjugada) e na bilirrubina total.

PRINCÍPIO

A bilirrubina é dosada por diazotização e formação de azobilirrubina vermelha com absorção máxima em 525 nm. A Bilirrubina Direta (diglicurônide) é dosada em meio aquoso, enquanto a total (direta e indireta) é dosada por ação de potente solubilizador de ação catalisadora.

MATERIAIS E REAGENTES UTILIZADOS

Aquecedor banho-maria
Cubeta
Espectofotômetro
Padrão
Pipeta automática
Pipeta graduada
Pipetador automático
Ponteiras para micropipeta
Soro
Tubos de ensaio

PROCEDIMENTO

Tomar 6 tubos de ensaio e proceder como a seguir:

Branco
Direta
Total
Água deionizada
2,0 mL
2,0 mL
-----
Acelerador (nº 1)
-----
-----
2,0 mL
Ácido Sulfanílico (nº 2)
0,2 mL
-----
-----
Diazo reagente
-----
0,2 mL
0,2 mL
Amostra
0,1 mL
0,1 mL
0,1 mL

Obs: foram realizados dois testes.
Misturar e esperar 5 minutos.
Determinar as absorbâncias das bilirrubinas direta e total em 525 nm, acertando o zero com o branco.

CÁLCULO

Teste 1