Quantificação da clorofila a e b em folhas de pisum sativum por espectrofotometria

Laboratório em biologia – prática, Dez.2006

Trabalho nº2

Quantificação da clorofila a e b em folhas de Pisum sativum por espectrofotometria ANDREIA GOMES (35531), ANDREIA RODRIGUES (35932), MARIA MORAIS (35587), SÓNIA VALENTE (35610) Objectivos:   Quantificar as clorofilas a e b em folhas de Pisum Sativum por espectrofotometria Inferir sobre o efeito do NaCl na quantidade de clorofilas

Introdução: A ervilheira (Pisum sativum) é uma planta fotoautotrófica, como tal possui cloroplastos com clorofilas. Estas são os pigmentos mais importante na absorção de luz durante o processo de fotossíntese e podem ser do tipo a, b, c e d. A clorofila b difere da a apenas no facto de o grupo metilo do carbono 3 ser substituído pelo grupo aldeído (CHO) de um resíduo formílico. Esta pequena diferença de estrutura química é suficiente para haver variância na cor e no espectro de absorção. [1] Os pigmentos fotossintéticos presentes e a sua abundância variam de acordo com a espécie. A clorofila a está presente em todos os organismos que realizam fotossíntese.
As clorofilas a e b encontram-se na natureza numa proporção de 3:1. [3]

A formação dos cloroplastos e das enzimas associadas é afectada pelo crescimento da planta em meio salino, como tal a quantidade de clorofilas presentes também o é.[2] Resultados: Peso das partes aéreas e volume usados na quantificação das clorofilas: Pgrupo 3 = (1,662 0,001) g Vgrupo3= (20 ± 0,5) mL Pcontrolo (1,710 0,001) g Vcontrolo= (27 ± 0,5) mL
Tabela 1. Leitura da densidade óptica, a dois comprimentos de onda diferentes, da solução resultante da extracção de clorofilas das partes aéreas das ervilheiras (Pisum sativum) sujeitas a uma concentração de 25mM de NaCl e de 0mM de NaCl (controlo).

Comprimentos de onda (nm) 645 663

Absorvância (grupo 3 - 25mM) 0,388 0,867

Absorvância (grupo controlo) 0,365 0,816

Ao comprimento de onda de 645nm corresponde a absorvância de 0,388, enquanto que aos 663nm corresponde uma absorvância de