Pseudoma ae

Prática de Bioquímica dos Microorganismos

Objetivo: Plaquear o material, colocando em meio de cultivo para contar à colônia que se formará da bactéria Pseudomonas aeruginosa.

Procedimento:

Com a pipeta de 500 ml, foi depositado no tubo 10-¹ o NaCl que se encontrava em um dos quatro tubos utilizados, denominado 37° aeróbio. O conteúdo do tudo 10-¹ foi homogenizado e logo após foi passado 0,5 ml de 10-¹ para 10-². E essa sequência foi sendo repetida até o 10-5, sempre 0,5 ml. E o conteúdo dos tubos sempre sendo homogenizados.

Colocou-se 1 ml de óleo mineral estéril em cada um dos dois tubos anaeróbios (um que ficaria em temperatura ambiente e outro à 37°).

Ao final do processo, formaram-se quatro tubos, sendo dois em temperatura ambiente e dois a 37°.

Foram oito placas de cada grupo, enumeradas de 10-8 até 10-15. Formando, assim, oito placas para cada um dos quatro grupos.

Com a pipeta de 1000 ml, pegou-se 1 ml de cada diluição e colocou-se em todas as placas. Sempre passados gradualmente, e sendo homogenizados.

O meio para crescimento foi colocado em todas as placas e depois foi feita uma rotação em formato de “8” repetitivamente dez vezes. O meio utilizado foi o Mueller Hinton.

O material foi colocado para crescer. Metade ficou em temperatura ambiente e metade foi para a estufa a 37°. Ficaram lá por pouco menos de 24 horas, porém a partir de 12 horas já poderiam ser contadas.

Resultado:

Foram escolhidas uma placa de cada grupo, para serem contadas. As escolhidas foram aquelas em que visivelmente deveria ter de 30 a 300 bactérias formadas. Visto isso, chegou-se a quatro resultados:

Tubo 10-10 a 37° anaeróbio: 42 bactérias foram contadas

Tubo 10-15 ambiente anaeróbio: 46 bactérias foram contadas

Tubo 10-14 a 37° aeróbio: 38 bactérias foram contadas

Tubo 10-14 ambiente aeróbio: 192 bactérias foram