Produção de proteirnas recombinantes

PRODUÇÃO DE PROTEÍNAS RECOMBINANTES

PROTEÍNAS RECOMBINANTES
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São proteínas produzidas artificialmente a partir de genes clonados. Técnica de DNA recombinante.

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Benefícios em várias áreas:

- saúde; - biologia; - bioquímica; - microbiologia; - genética; - biotecnologia; - agricultura.

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Aplicação:
Exemplo: Terapia Gênica

Introdução de um gene num organismo e conseqüente correção de doenças genéticas.

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- Melhoramento animal e vegetal

Plantas resistentes a pragas e a diferentes meios nutritivos. Animais de maiores dimensões,mais férteis e carne com maior qualidade.

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- Criação de modelos animais

Ideais para o estudo da estrutura, função e regulação de um gene, além de facilitar a compreensão da fisiopatologia da doença.

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Técnica de produção:

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Isolar e preparar o DNA; - Escolher o vetor apropriado; - O fragmento de DNA a ser clonado é introduzido em vetores de clonagem, formando-se o DNA recombinante; O DNA recombinante é inserido na célula hospedeira – transformação; Seleção e identificação de células que incorporam o DNA recombinante; - Verificar se a proteína foi expressa; - Remoção e purificação das proteínas.
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Algumas enzimas envolvidas na produção: Endonuclease de restrição
DNA ligase Transcriptase reversa

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Vetores de clonagem: capaz de transportar uma seqüência de DNA estranha dando origem a um DNA recombinante. Fácil de purificar. Tipos de vetores: Plasmídeos Cosmídeos Bacteriófagos

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Extração e purificação de proteínas:
Extração Purificação lise celular cromatografia de afinidade

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Exemplos: Hormônio de crescimento humano Anticoagulantes
Anticorpos monoclonais Insulina

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