Métodos de determinação do colesterol

Método de Liebermann-Burchard:
A reação se processa quando o ácido sulfúrico concentrado é adicionado à uma solução de colesterol em anidrido acético. As cores produzidas variam do vermelho ao violeta e ao azul esverdeado. A cor esverdeada é devida a formação de um derivado sulfônico de colesterialeno.
Método de Zlatkis, Zak e Boyle:
O colesterol do soro reage com o o-ftalaldeído, em meio acético-sulfúrico, produzindo um composto de cor púrpura, cuja intensidade de cor é diretamente proporcional à concentração de colesterol presente na amostra.
Este método é 4 a 5 vezes mais sensível que a reação de Liebermann-Burchard.
Método de Leffler-McDougald:
O isopropanol é utilizado para precipitar as proteínas e, ao mesmo tempo, extrair o colesterol. Sobre uma alíquota do extrato, adiciona-se o reativo férrico-acético que, em meio sulfúrico, forma um composto colorido que é determinado espectrofo-tometricamente.
Método de Leffler-McDougald modificado:
As proteínas são precipitadas e o colesterol extraído a um só tempo, pelo próprio reativo cromogênico, o qual contém ácido acético. O cloreto férrico incorporado ao reativo, juntamente com o ácido sulfúrico, oxida o colesterol nas posições 3 e 6, produzindo D 4-colesten-3,6-diona. A intensidade da coloração âmbar é diretamente proporcional à concentração de colesterol existente na amostra.
Método de Huang e colaboradores modificado:
O anidrido acético precipita as proteínas, retirando a água de solvatação das mesmas e, ao mesmo tempo, contribui para a formação de um complexo. O ácido sulfúrico dissolve o precipitado, pois baixa o pH além do pI das proteínas. Pela desidratação que ocorre no nível insaturado do núcleo do colesterol (posição 5 e 6), forma-se um derivado sulfônico de coloração verde cuja intensidade é diretamente proporcional à concentração de colesterol existente na amostra.
Métodos que utilizam processos enzimáticos:
Os ésteres de colesterol existentes no soro ou plasma são hidrolisados pela ação