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Biotecnologia (1º ciclo)
Métodos Instrumentais de Análise
Ficha nº 2 - Espectrofotometria de absorção molecular no UV-vis

I- Espectrofotometria de absorção molecular no UV-vis
1.

Temos três soluções não identificadas e sabemos que são de pentano, 1,3-pentadieno e
1,4-pentadieno, e todas com a mesma concentração. Será possível distingui-las usando espectrofotometria de absorção molecular no UV-Vis. Justifique a sua resposta.

2.

Identifique o(s) grupo(s) cromóforo(s) e auxocrómos do seguinte corante azo.

3.

Num espectrofotómetro de absorção de UV-Vis, usado para análises de rotina, efectuouse uma série de determinações em amostras desconhecidas para a determinação de um determinado analito, a um c.d.o. conhecido. Todos os valores de absorvância obtidos estavam entre 2 e 3.
I. De uma maneira geral, estes resultados não podem ser usados para determinações quantitativas, porquê?
II. Sugira uma solução para o problema.

II– Lei de Lambert-Beer – Análise Quantitativa

Lei de Lambert-Beer
Transmitância = T = I/I0 = 10-a b c a = constante proporcionalidade = absortividade
-log T = a b c = A = absorvância

A absortividade (a) é contante para:
1- __________________________________________________________________
2- __________________________________________________________________
3- __________________________________________________________________

O valor numérico depende das unidades de concentração. ε absortividade molar, c expressa em_______________________
[c]

mg/l, a unidade da absortividade será ____________________

1

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Ficha nº 2 - Espectrofotometria de absorção molecular no UV-vis

Calibração com uma única solução padrão

1. Um composto com massa molar de 292,16 g/mol foi dissolvido num balão volumétrico de
5 mL. Desta solução foi retirada uma alíquota de 1,00 mL, colocada num balão volumétrico de 10,0 mL e diluída até a marca do balão. A