Determinação da glicose no plasma humano nos estados de jejum e alimentado

AULAS PRÁTICAS DE BIOQUÍMICA METABÓLICA
RELATÓRIO

1 – Identificação.
Experimento: Determinação da glicose no plasma humano nos estados de jejum e alimentado.

2 – Objetivo do trabalho prático.
- Descrever o método de determinação da glicose;
- Preparar as amostras de plasma;
- Realizar a dosagem colorimétrica da glicose.

3 – Descrever de forma sucinta o método utilizado neste experimento.
A medida da quantidade de glicose plasmática se baseia na transformação da glicose, através de uma sequência de reações, em um composto colorido, que é medido quantitativamente através da absorciometria. Onde a glicose é convertida em ácido glicônico e peróxido de hidrogênio. Este último, na presença da enzima peroxidase, forma a quinoneimina, um composto de cor vermelha que pode ser medido quantitativamente no comprimento de onda de 505 nm. A intensidade da cor vermelha é proporcional a quantidade de glicose.

4 – Resultados:
4.1 – Absorbância e quantidade de glicose da curva padrão.

Tubos
Absorbância
Quantidade de glicose no tubo reacional (mg)
1
0,155
0,01 mg
2
0,247
0,02 mg
3
0,353
0,03 mg

Tubo 1: 10 mg -------- 100 mL Tubo 2: 10 mg -------- 100 mL x -------- 0,1 mL x -------- 0,2 mL x= 0,01 mg x= 0,02 mg

Tubo 3: 10 mg -------- 100 mL x -------- 0,3 mL x= 0,03 mg

4.2– Construção da curva padrão.

4.3 – Cálculo da constante “K”.

LEMBRE-SE: K = a / q q = quantidade absoluta a = absorbância

K = K1 + K2 + K3 / 3
Cálculos:
K1 = 15,5 u.a/mg K2 = 12,35 u.a/mg K3= 11,76 u.a/mg

K1 = a/q K2 = a/q K3= a/q
K1 = 0,155 u.a/0,01 mg K2 = 0,247 u.a/0,02 mg K3= 0,353 u.a/0,03 mg
K1 = 15,5 u.a/mg K2 = 12,35 u.a/mg K3= 11,76 u.a/mg