Detecção molecular do vírus da hepatite A em diferentes ecossistemas aquáticos da região Metropolitana de Belém-PA

DETECÇÃO MOLECULAR DO VÍRUS DA HEPATITE A (HAV) EM DIFERENTES
ECOSSISTEMAS AQUÁTICOS DA REGIÃO METROPOLITANA DE BELÉM-PA
Bolsista: Tereza Cristina Monteiro Gurjão
Orientador (a): Lena Líllian Canto de Sá
Serviço: Meio Ambiente
Introdução: O vírus da hepatite A possui distribuição mundial, sendo endêmico em muitas regiões, incluindo a região Norte e variando amplamente em função do nível socioeconômico e das condições de saneamento. A principal via de transmissão do HAV é a fecal-oral, tendo como veículo, a água e alimentos contaminados por fezes contendo o vírus. Objetivo:
Detecção do HAV em amostras de água oriundas de diferentes ecossistemas aquáticos da região metropolitana de Belém-PA. Material e Métodos: Foram realizadas coletas mensalmente em 7 locais: Esgoto do UNA, Porto do Açaí, Ver-o-Peso, igarapé Tucunduba, canal do Água Preta, lago Bolonha e Estação de tratamento de água Bolonha. Analises físicoquímicas e bacteriológicas das amostras foram realizadas. 2 L de água foram concentrados e centrifugados obtendo-se um volume final de 2 mL. O RNA viral foi extraído pelo kit comercial
(QIAGEN). Após a obtenção do cDNA pela transcrição reversa, a região da junção VP1/2A do genoma do HAV foi amplificada usando o Nested-PCR. Os amplicons foram purificados com o kit de purificação (QIAGEN). Sequenciamento direto foi realizado em ambas as direções. Os resultados foram analisados no sequenciador automático. O pacote GCG foi usado no alinhamento nucleotídico e na obtenção da sequência amionoacídica. A árvore filogenética foi criada usando o método de neighbor-joining e o modelo Kimura, 2 parâmetros com o software
MEGA. Resultados/Conclusões: Foram coletadas 165 amostras entre 09/2008 a 08/2010, das quais o RNA viral do HAV foi detectado em trinta e três amostras (20%), sendo oriundas de quatro, dos sete pontos de amostragem. Dentre as amostras positivas um percentual de positividade de 39.4%, 36.4%, 15.1%, 9.1% ficam distribuídos entres os pontos