Cromatografia em RPB

Sumário
UNIVERSIDADE ESTADUAL DE CAMPINAS
FACULDADE DE ENGENHARIA QUÍMICA
DEPARTAMENTO DE PROCESSOS BIOTECNOLÓGICOS

Introdução - Cromatografia
Seleção e combinação de técnicas de purificação

CROMATOGRAFIA EM RPB

Funcionamento Básico de uma Coluna Cromatográfica
Cromatografia de troca iônica

Acadêmicos: Luana Cristina Andrade
Yuan Ming Tsai
Prof°: Everson Miranda

Cromatografia de interação hidrofóbica
Cromatografia de afinidade
Cromatografia de filtração em gel / exclusão molecular
Fase reversa

Campinas - 2009

Introdução - Cromatografia

Seleção e combinação de técnicas de purificação

Resolução

Método físico-químico de separação baseado na migração diferencial dos componentes de uma mistura de acordo com as diferentes interações entre duas fases imiscíveis (fase móvel e fase estacionária) Velocidade

Capacidade

Recuperação

Funcionamento Básico de uma Coluna Cromatográfica

Características das resinas cromatográficas

Abaixo está representado o esquema geral de uma cromatografia:
Cromatografia de filtração em gel ou exclusão molecular:
Tempo zero
Amostra com diferentes componentes
Resina
embebida em tampão

Tempo 2

Tempo 1

Mais tampão é colocado na coluna, forçando os componentes da amostra a interagirem com a resina

Tempo n
Líquido
que sae da coluna é recolhido em tubos de um coletor de frações Componentes da amostra se separam e saem da coluna com diferentes volumes de tampão Cromatografia de troca iônica: separação de moléculas pela carga elétrica géis apresentam grupos carregados positivamente ou negativamente

Cromatografia de adsorção (fase reversa ou hidrofóbica): separação de moléculas pela solubilidade relativa em meio aquoso géis possuem caráter hidrofóbico

Os componentes da mistura são separados por interação diferenciada com a resina, com base em propriedades moleculares como:
Coletor de frações Cromatografia de afinidade: