Citologia
PRÁTICA 3 ISOLAMENTO DE DNA E DIVISÃO CELULAR
OBJETIVOS DA AULA
Isolar DNA de cebola
Identificar as diferentes fases da Mitose em lâminas permanentes;
1. Isolamento do DNA da cebola
1. Ralar meia cebola;
2. Preparar a solução de lise: 5 mL de detergente de cozinha + 0,75 g de sal de cozinha (NaCl) + água (até completar o volume de 25mL);
3. Colocar a meia cebola ralada em um béquer e acrescentar 25 mL da solução de lise;
4. Incubar a mistura a 60C e continuar misturando a solução por, aproximadamente, 15 minutos;
5. Rapidamente, retirar a mistura do banho e colocá-la no gelo por alguns minutos;
6. Filtrar a solução usando filtro de café;
7. Passar 5 mL para um tubo de ensaio e ir acrescentado álcool absoluto lentamente (5mL);
8. Observar na interface a formação de um precipitado esbranquiçado;
9. Com a ajuda de um palito de madeira, enrolar o material esbranquiçado;
10. Baseando-se no que foi visualizado em cada etapa, responda:
(a) Qual é a função da solução de lise?
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(b) Qual é a função do NaCl na precipitação?