biomedicina

CROMATOGRAFIA
Histórico

M. TSWEET (1903): Separação de misturas de pigmentos vegetais em colunas recheadas com adsorventes sólidos e solventes variados. éter de petróleo mistura de pigmentos CaCO3

pigmentos separados Cromatografia = kroma [cor] + graph [escrever]
(grego)

CROMATOGRAFIA
Princípio Básico

Separação de misturas por interação diferencial dos seus componentes entre uma FASE ESTACIONÁRIA (líquido ou sólido) e uma FASE MÓVEL (líquido ou gás).

CROMATOGRAFIA

Modalidades e Classificação
FM = Líquido

Cromatografia
Líquida

FM = Gás

Cromatografia
Gasosa (CG)

Sólida

Cromatografia
Gás-Sólido (CGS)

Líquida

Cromatografia
Gás-Líquido (CGL)

Em CG a FE pode ser:

Tipos de Cromatografia
• Cromatografia sólido-líquido em coluna
• Cromatografia em camada delgada analítica
• Cromatografia em camada delgada preparativa
• Cromatografia em papel
• Cromatografia a gás (ou gás-líquido)
• Cromatografia líquido-líquido

Fase estacionária
Estruturas da silica gel:
Silica gel de fase normal

Silica gel de fase reversa (polímeros de octadodecilsilane)

Esquematização de um cromatograma obtido por CCD
Fase estacionária: Silica gel ou Alumina (Al2O3)

Esquematização de um cromatograma obtido por CCD
Fase estacionária: Silica gel

Visualização em câmara com luz ultravioleta: 254 nm

http://www.chem-ilp.net/labTechniques/LabTechniques.htm

Esquematização de uma cromatografia em coluna

OU

Antes de se fazer a coluna, deve-se fazer várias placas cromatográficas até achar a melhor separação entre os vários componentes e depois utilizar esse solvente na separação cromatográfica em coluna.

Vários CCDs de uma mesma amostra em sistemas diferentes

a) Aplicação da amostra sobre a placa utilizando um capilar;
b) Desenvolvimento do cromatograma;
c) Revelação da placa cromatográfica após o desenvolvimento; d) O cromatograma final, onde se pode observar três manchas