ArtigoROND NIA

EPIDEMIOLOGIA MOLECULAR DE Anaplasma marginale (Theiler, 1910) EM BOVINOS CRIADOS NO ESTADO DE RONDÔNIA.

Luciana Gatto Brito1, Márcia Cristina de Sena Oliveira2,
Resumo

A anaplasmose bovina é uma doença causada pela rickettsia intraeritrocítica Anaplasma marginale transmitida pelo carrapato Rhipicephalus (Boophilus) microplus. É caracterizada por anemia, perda de peso, decréscimo na produção de carne e leite, aborto e morte causando grandes prejuízos a saúde e produção animal em todo o mundo. O objetivo deste trabalho foi determinar a taxa de prevalência de A. marginale em 1650 amostras de coágulos sangüíneos provenientes de bezerros entre quatro e doze meses de idade de oito microrregiões do estado de Rondônia. Para a extração de DNA utilizou-se o Kit GFX™ Genomic Blood DNA Purification (Amershan Pharmacia Biotech) e através da técnica da Reação em Cadeia da Polimerase (PCR) foi possível verificar taxa de prevalência de 98,6% em Rondônia. Os produtos de amplificação foram submetidos à eletroforese em gel de agarose a 1,5% e visualizados em transluminador UV, sendo considerados positivos os amplicons correspondentes a 458 pares de bases. Realizou-se a purificação de cada amplicon específico obtido na reação de PCR com o primer msp1. A separação foi realizada por eletroforese em gel de agarose (low melting) a 1,5%; o fragmento obtido do gel foi purificado com o kit SV gel PCR clean-up System™ (Promega©) e o produto foi quantificado no bioanalisador Agillent 2100 Bionalyzer. As seqüências obtidas foram submetidas ao Blast para a verificação da identidade e então depositadas no Banco Genético do NCBI. O alinhamento e as análises do gene msp1 de A. marginale foram realizados através do algoritmo ClustalW, comprovando-se a presença do hemoparasita no estado, onde concluiu-se que as taxas de prevalência não diferiram significativamente entre as microrregiões analisadas, sendo alta e homogênea, o que as caracteriza como áreas de estabilidade enzoótica para A.