Apostila de laboratório de bioquimica da licenciatura em ciências exatas

PRÁTICA 1

DETERMINAÇÃO DE PONTO DE FUSÃO E SOLUBILIDADE DE DOIS AMINOÁCIDOS

I. Materiais e equipamento a ser utilizados

- 2-tubos de Thielle; - 2 suportes com garras; - termômetro; - vidro de relógio ou tubinho de vidro - tubos capilares de vidro, - elástico de látex - tubo de vidro comprido - espectrofotômetro no ultravioleta - espátula pequena - 4 tubos de ensaio médios - nujol;

II. Procedimentos

A) Determinação de ponto de fusão

1. Pulverizar uma pequena porção de do aminoácido em um almofariz, se estiver em blocos duros.
2. Fechar uma das extremidades do capilar no bico de Bunsen se estiver aberta.
3. Introduzir o aminoácido no capilar, compactando-o. Proceder a compactação da amostra, deixando o capilar cair por uma vareta de vidro. Esta operação deverá ser repetida tantas vezes quantas forem necessárias, para que se tenha compactado, no capilar, aproximadamente 1 cm da substância.
4. Prender, através de anel de látex, o capilar ao termômetro, de tal forma que a parte que contém a amostra fique junto ao bulbo do mesmo.
5. Montar a aparelhagem ao lado, utilizando como banho Glicerina.
6. Aquecer o tubo de Thielle lentamente, deslizando a chama sobre a parte lateral inferior do mesmo.
7. Observar cuidadosamente até o ponto de fusão e anotá-lo.

B) Determinação de solubilidade

1. Adicionar em um tubo de ensaio cerca de 2mL de água destilada e uma ponta de espátula da de uma das amostras de aminoácido e observe a sua solubilização. Repita o mesmo procedimento com a outra amostra.
2. Com as duas soluções diluídas no item anterior tire um espectro no espectrofotômetro de ultravioleta na região entre 220-300nm.

III. Questões

1. Quais os aminoácidos existentes na tua amostra?? Justifique.

2. Existe outro processo físico-químico para determinar os aminoácidos? Explique.

3. Quais experimentos você utilizaria para caracterizar rapidamente os aminoácidos?