TECNICAS DE BIOLOGIA MOLECULAR DNA RECOMBINANTE

TECNICAS DE BIOLOGIA MOLECULAR Extracao de DNA Fenol (Desnaturacao das proteinas) / coloroformio (retira residuos de fenol) /alcool isoamilico (reduz espuma) Lise celular auxiliada mecanicamente Precipitacao do RNA com alcool isopropilico Ressuspensao do RNA Analise do RNA extraido Qualidade da estração: visualizacao em gel de agarose com brometo de etidio. Na eletroforese: 28S, 18S, 5S. Eletroforese Reação em Cadeia da Polimerase Isolar e amplificar o DNA. Aplicações: 1) sequenciamento de genomas 2) expressao de genes em sistema recombinante 3) estudo de biologia molecular 4) teste de dna 5) estudo de doencas infecciosas. PCR em tempo real (analise qualitativa - ausencia ou presence de um gene - ou quantitative – qtde de um gene). Quantitativo (carga viral,expressao genica, transgenicos). Qualitativo (SNPs, patógenos). Monitoramento da reacao; deteccao do produto a medida em que esta sendo formado. - Primer. Sybr Green. Sistemas de Detecção: Sondas (R: reporter / Q: quencher). Florocromo >> Fluorescencia. Hibridização. Tipagem de individuo, teste de paternidade, identificação de criminoso, descoberta de novos genes. Sequenciamento Genético. Método de Sanger: consiste em identificar continuamente e sequencialmente, ultimo nucleotídeo incorporado na cadeia. DNA Polimerase so trabalha no sentido 5’> 3’. Adiciona desoxirribonucleosideo trifosfatado. No terminal livre de 3’OH >> sequencia pre existente (primer). Os ddNTPs são terminadores (não possuem 3’OH…

1 A técnica central da metodologia do DNA recombinante é a clonagem molecular, a qual consiste no isolamento e propagação de moléculas de DNA idênticas. A clonagem molecular compreende pelo menos dois estágios importantes. Primeiro, o fragmento do DNA de interesse chamado de inserto é ligado a uma outra molécula de DNA chamada de vetor para formar o que se chama de DNA recombinante. Segundo, a molécula do DNA recombinante é introduzida numa célula hospedeira compatível, num processo…

Sumário INTRODUÇÃO 1 DNA RECOMBINANTE 2 PROCESSO DO DNA RECOMBINANTE 3 A TECNOLOGIA DO DNA RECOMBINANTE 4 DNA RECOMBINANTE E AS INDÚSTRIAS. 5 DNA E SAÚDE 6 CONCLUSÃO....................................................................................7 INTRODUÇÃO: A técnica de DNA recombinante é um importante mecanismo de inserção gênica em bactérias, com esse processo é possível produzir diversas substâncias em larga escala. Sabemos que um gene é um…

GENÉTICA Aula 7 – Fundamentos das Tecnologias do DNA Recombinante GENÉTICA É importante que você saiba que até a década de 70, o DNA era o componente celular mais difícil de ser analisado. Sua sequência de nucleotídeos de enorme tamanho e monotonia química era geralmente analisada por meios indiretos como a sequência de proteínas e análise genética. A partir da década de 70, novas tecnologias foram desenvolvidas permitindo o isolamento e a purificação de…

A Tecnologia do DNA Recombinante e Suas Múltiplas Aplicações Publicado em 31 de outubro de 2008 em Arte e Ciência A Tecnologia do DNA Recombinante e Suas Múltiplas Aplicações Imprimir RSS Sobre este autor(a) José Robério De Sousa Almeida Graduado em Ciências ? Química e Biologia ? Universidade Estadual do Francisco George Rodrigues de Andrade[1] INTRODUÇÃO Desde a elucidação da complexa estrutura da molécula de DNA, em 1953, segundo modelo proposto por Francis…

Tecnologia do DNA Recombinante Cindy Vilas Boas - 11015411 Jordana Carnicelli - 11126011 Tópicos 1. Dogma Central da Biologia Molecular 2. Algumas técnicas que compõem a tecnologia do DNA Recombinante 3. Um pouco sobre bactérias 4. A tecnologia do DNA Recombinante 5. Importância, aplicações e implicações éticas Dogma Central da Biologia Molecular Importante: há contradições: • O RNA pode sofrer replicação em alguns vírus e plantas; • O RNA viral, através de uma enzima…

caracterizar sua estrutura e funcionamento. A tecnologia do DNA recombinante permitiu que genes individuais fosse isolados em um tubo de ensaio e então caracterizados em um nível molecular. A tecnologia e baseada nas tecnologias de restrição nas enzimas de restrição, cortam o DNA em fragmentos definidos. Os sítios alvos de restrição podem ser mapeados e atuar como marcos para o DNA. Os fragmentos de restrição em geral tem pontas adesivas, possibilitando que eles sejam inseridos inseridos…

DNA RECOMBINANTE Na década de 1970, surgiu a tecnologia do DNA recombinante e, com essa técnica, houve um aumento acelerado no ritmo das pesquisas. Com isso, a palavra Biotecnologia passou a ser usada e foi definida sendo um conjunto que abrange diferentes áreas do conhecimento como: Imunologia, Genética, Biologia Molecular e Celular, Microbiologia, entre outras. Além das diferentes áreas, a biotecnologia tem aplicações importantes em vários segmentos, como na agricultura, mineração,…

agricultura e no meio ambiente, trazendo enormes benefícios à humanidade, através da criação da Tecnologia do DNA recombinante. A descoberta dessa tecnologia possibilitou que o homem pudesse desenvolver técnicas que modificassem e até criasse novos organismos. Desde seu surgimento, em 1970, as descobertas e aplicações das manipulações genéticas não pararam mais, dentre elas podemos citar os organismos que tiveram genes de outro ser vivo, inseridos em seu código genético: os organismos…

complexa estrutura da molécula de DNA, em 1953, segundo modelo proposto por Francis Crick e James Watson, a Ciência nunca mais foi à mesma. Mais tarde, em 1958, Crick relaciona o DNA, o RNA e as proteínas, salientando o fluxo unidirecional da informação, do DNA à proteína. Apesar destas descobertas e dos avanços obtidos, de acordo com Nascimento et al (2003) até o início da década de 70 o material genético dos organismos era o componente químico mais difícil de ser analisado, quando…