Dna Genómico Lacz

macromoléculas de uma célula, sejam elas enzimas ou não. Um exemplo clássico é a ativação do operon Lac de Escherichia coli. Um operon “é uma unidade de expressão e regulação gênica bacteriana, incluindo genes estruturais e elementos de controle no DNA reconhecidos pelos produtos de genes reguladores” (Lewin - Genes VII, 2000). Quando uma população de E. coli cresce num meio que contém glicose, o operon Lac está “desligado”. Se esta mesma população for transferida para um meio contendo…

2. DNA: estrutura e replicação 2.a. A Natureza química do gene Até cerca de 50 anos atrás a natureza química do gene era um mistério. Temos a tendência a imaginar que a descoberta do DNA como a molécula que armazena a informação genética na maior parte dos seres vivos foi feita por um único grupo de pesquisa, de uma só vez, e sem correlação óbvia com os trabalhos anteriores. Procuraremos mostrar que este não foi o caso, ao mesmo tempo que comentaremos os pontos mais importantes que…

transferir genes para células e tecidos é por meio da inoculação de DNA puro, com técnicas de microinjeção; eletroporação e o método biobalístico. Métodos mais elaborados e mais eficientes incluem a administração de DNA encapsulado (e.g., liposomos); ou através de vetores virais, que podem ser fragmentos de DNA de vírus contendo o DNA a ser transferido; ou mesmo a partí- cula viral formada por proteínas virais empacotando um DNA viral modificado de maneira a tornar o vetor…

........................................................................................................ 13 Capítulo 2 A descoberta do DNA como transmissor da informação gênica e o surgimento da engenharia genética.............................................................................................................. 18 Unidade II Manipulação do DNA........................................................................................................................... 21 Capítulo 3

Redução de hidroperóxidos e relação com o sistema redutor das TPx............... 18 Figura 4. Diferentes formas oligoméricas de cTPxI........................................................... 20 Figura 5. Resultado da extração de DNA de S. cerevisiae................................................. 43 Figura 6. Resultado da amplificação dos genes nTPx, Mec3, Dog2, Pcl1 e Gts1.............. 44 Figura 7. Resultado de dupla digestão de nTPx com Bam HI e…

e hereditariedade soft 2.3 – Hereditariedade de estados epigenéticos através das gerações 2.4 – Autonomia das marcações epigenéticas 2.5 – Resumo das modificações químicas do DNA que não alteram a sua sequência nucleotídica 3 – Diferentes mecanismos biológicos que interferem na maquinaria epigenética 3.1 – Metilação do DNA 3.2 – Modificações das histonas 3.2.1 – Biotinilação das histonas 3.2.2 – Poli (ADP – ribosilação) das histonas 3.3 – Estrutura da cromatina, diversidade funcional das…

in vitro e Northern blot. 4. Extração do DNA genômico O DNA genômico será extraído utilizando o DNAzol (Gibco) seguindo as instruções do fabricante, como se segue: Serão pulverizados folhas de maracujá com nitrogênio líquido e, cerca de 0,1 g será transferido para um tubo de microcentrífuga contendo 300 L de DNAzol e 300 L de clorofórmio. Após centrifugação de 10 minutos a 12000 g, a fase aquosa da solução será transferida para outro tubo. O DNA será precipitado pela adição de…

........................... 1 2 3 3 4 7 EXTRAÇÃO E PURIFICAÇÃO DE DNA EM BACTÉRIAS ......................... 11 MARCADORES MOLECULARES.................................................................. 14 2.5.1 Amplificação ao Acaso de DNA Polimórfico (RAPD)................................... 15 2.5.2 Reação em Cadeia da Polimerase (PCR)........................................................ 19 2.5.3 Seqüenciamento do DNA ....................................................................

visualizados com microscópio ótico, apenas através de microscopia eletrônica, pois seu tamanho varia na ordem de nanômetros (1nm = 10-3 µm = 10-3 mm; portanto na escala de milionésimos de milímetros). Possuem como material genético DNA ou RNA. Em organismos celulares, o DNA é sempre o material genético (que armazena a informação genética - os genes) e o RNA é o principal componente da maquinária biossintética da célula (na forma de ribossomos, mRNA e tRNA). As proteínas codificadas…

. . . . . . . . . . . . . 67 4.1 Etapas do protocolo de extração do DNA genômico bacteriano . . 74 4.2 Etapas do protocolo de extração do produto de PCR . . . . . . . . 76 4.3 Mapa do vetor de clonagem pGEM-T Easy (PROMEGA) . . . . . . 77 4.4 Mapa do vetor de expressão pET-23a(+)(Novagen) . . . . . . . . . . 79 4.5 Mapa do vetor de expressão pET-28a (Novagen) . . . . . . . . . . . 81 4.6 Etapas do protocolo de extração de DNA plasmidial . . . . . . . . 85 4.7 Esquema geral da reação de oxidação