Teste de halo de inibição
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Teste de halo de inibição O Staphylococcus aureus é um importante patógeno causador de uma ampla variedade de enfermidades comumente adquiridas como infecções, intoxicações alimentares e síndromes sistêmicas. A prevalência de múltiplas classes de resistência aos antibióticos tem complicado os tratamentos, além de aumentar a morbidez e a mortalidade associada com patologias estafilocócicas (BOZDOGAN; APPELBAUM, 2004; MEKA, et al. 2004). Material e Métodos Placas de Petri (10 cm de diâmetro); Meio de cultivo Mueller-Hinton Agar (padrão para antibiograma); Discos de antibiótico (gentamicina); Cepa padrão. Produtos microbicidas. Protocolo O meio de cultivo será preparado e esterilizado conforme as instruções do fabricante e distribuído em placas de Petri. Para a obtenção da bactéria, 100 µL da solução estoque (armazenada em glicerol 10% e mantido sob congelamento) serão incubados em 10 mL de caldo BHI ou de triptona de soja (TSB) e permaneceram sob 8 agitação lenta e constante por 18 horas à 37º C. A cultura será diluída na concentração de 3 x 10 UFC/mL (Unidades Formadoras de Colônia /mL), ajustada pela escala MacFarland, e 100 µL desta suspensão serão inoculados em superfície de Agar Mueller-Hinton e espalhadas com o auxílio de uma alça de Drigalsky até a secagem do mesmo (de 5 a 10 minutos T ambiente; em placa molhada corre o risco dos discos deslizarem). Sobre o material semeado serão depositados 6 discos, de 6 mm de diâmetro, de diferentes produtos. Também, como parâmetro, será usado um disco contendo antibiótico Gentamicina 10 µg. As placas serão incubadas à 37ºC por 24 horas. Após este período, será realizada a leitura do diâmetro dos halos de inibição com o auxílio de uma régua. Os resultados serão comparados com os halos de inibição formados pelos discos de gentamicina (10 µL). Será realizado o registro fotográfico dos mesmos. Figura 1. Disposição dos discos em placa em 2 repetições (vista das placas de frente, sem a tampa)
Placa 1
G en t