Teste de concentra o inibit ria m nima CIM
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Teste de concentração inibitória mínima (CIM)1. Preparar uma solução estoque de ceftazidima (teor de 72,32%) contendo 1280 micrograms/mL;
2. A partir da solução estoque, preparar as seguintes diluições:
Solução 1: 1 mL da solução estoque (1280 microgramas/mL)+ 9 mL de meio de cultura (128 microgramas/mL)
Solução 2: 1 mL da solução 1 mL da solução 1 (128 microgramas/mL) + 1 mL do meio de cultura (64 microgramas/ml)
Solução 3 : 1 mL da solução 1 (128 microgramas/mL) + 3 mL do meio de cultura (32 microgramas/ml)
Solução 4 : 1 mL da solução 1 (128 microgramas/mL) + 7 mL do meio de cultura (16 microgramas/ml)
Solução 5 : 1 mL da solução 1 (128 microgramas/mL) + 15 mL do meio de cultura (8microgramas/ml)
3. Preparar uma suspensão da Pseudomonas aeruginosa com turbidez compatível com a escala 0,5 da escala de MacFarland e diluir a 1/10.
4. A partir das soluções acima preparar o ensaio de CIM:
Tubo 1- 1 mL da solução 1 (128 micrograma/mL) + 1 mL do inóculo= 64 microgramas/mL
Tubo 2- 1 mL da solução 2 (64 micrograma/mL) + 1 mL do inóculo= 32 microgramas/mL
Tubo 3- 1 mL da solução 3 (32 micrograma/mL) + 1 mL do inóculo= 16 microgramas/mL
Tubo 4- 1 mL da solução 4 (16micrograma/mL) + 1 mL do inóculo= 8 microgramas/mL
Tubo 5- 1 mL da solução 5 (8 micrograma/mL) + 1 mL do inóculo= 4 microgramas/ml
5. Incubar os tubos acima por 18 a 24 horas à 35°C
6. Verificar após a incubação, qual foi a menor concentração que inibiu o crescimento bacteriano.