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4 páginas
1Espectrofotometria: Noção de curva de calibração e recta padrão.
RELATÓRIO
Autores
Turno
4
Grupo
1
Contacto
1. Rita Teixeira
4. Diana Teixeira
2. Vanessa Fonseca
5.
3. Rui Barbosa
Data da aula:
13
01
2015
1. Faça a legenda da figura seguinte:
1 - Interruptor On-Off
2 - Impressor opcional
3 - Ecrã LCD
4 - Painel de Controlo
5 - Tampa do compartimento da amostra
6 - Tampa para o compartimento da lâmpada
2. Preencha a tabela com os valores obtidos na primeira parte da experiência:
Comprimento
de onda (nm)
535
550
565
580
595
Comprimento de onda (nm)
610
625
640
655
Absorvância
0,092
0,313
0,586
0,763
0,816
Absorvância
0,785
0,697
0,671
0,421
3. Construir um gráfico com os valores da primeira parte da experiência de comprimento de onda (variável independente) em abcissas, e os respetivos valores de absorvância (variável dependente) em ordenadas.
1
Absorvancia
0,8
0,6
0,4
0,2
0
0
100
200
300
400
500
Comprimento de onda (nm)
| sa | bioquímica |
600
700
4. Preencha a tabela com os valores obtidos na segunda parte da experiência:
TUBO
(mg/mL)
ABS a 595 nm 0
0,1
0,2
0,3
0,4
0,5
1,0
2,5
0,000
0,395
0,586
0,465
0,560
0,565
0,614
0,572
5. Construir o gráfico da curva de calibração do método de Bradford.
Curva de calibração método de
Bradford
0,7
Absorvancia
0,6
0,5
0,4
0,3
0,2
0,1
0
0
0,5
1
1,5
2
2,5
3
Comprimento de onda (nm)
6.
Desenhe a recta padrão.
Curva de calibração método de y = 0,9143x + 0,1998
Bradford
R² = 0,5935
0,7
Absorvancia
0,6
0,5
0,4
0,3
0,2
0,1
0
0
0,1
0,2
0,3
0,4
Comprimento de onda (nm)
| sa | bioquímica |
0,5
0,6
7. Determine a equação da recta.
Y = mx + b <=> ABS =0,9143x + 0,1998
8. Indique, justificando, o limite de validade do método em mg/mL.
Este método em mg/mL é válido até ao ponto em que a absorvância estabiliza, sendo este o ponto de saturação. A partir deste ponto a curva de calibração vai diminuindo os seus valores.
9. Determine a equação de Lambert-Beer, indicando