Reatório Caracterização de Aminoácidos e Proteínas

AULA PRÁTICA: CARACTERIZAÇÃO DE AMINOÁCIDOS E PROTEÍNAS

OBJETIVOS:
Caracterização e identificação de aminoácidos e proteínas, e avaliação da solubilidade das proteínas sob diferentes influências.

REAÇÃO DE IDENTIFICAÇÃO DE AMINOÁCIDOS
Procedimento:
Foram utilizados 3 tubos de ensaio, nomeados de A, B e C.
No tubo A adicionou-se 2mL de Reativo de Ninhidrina 0,1% e 2,5mL de água destilada.
No tubo B adicionou-se 2 mL de Reativo de Ninhidrina 0,1% e 2,5mL de Solução de Aminoácido.
No tubo C adicionou-se 2mL de Reativo de Ninhidrina 0,1% e 2,5mL de Solução de proteína a 10%.
Em seguida, foram agitados e colocados em banho-maria durante 5 minutos.

REAÇÃO DE IDENTIFICAÇÃO DE PROTEÍNAS
Procedimento:
Foram utilizados 3 tubos de ensaio, nomeados de D, E e F.
Nos 3 tubos adicionou-se 2mL de Solução de Hidróxido de Sódio 5% e 2 gotas de Solução de Sulfato de Cobre 1%.
No tubo D foi adicionado 2mL de água destilada.
No tubo E foi adicionado 2mL de Solução de Aminoácido.
No tubo F foi adicionado 2mL de Solução de Proteína a 10%.
Logo após a adição dos reagentes agitou- se os tubos e observou-se mudança na coloração.

REAÇÕES PARA AVALIAÇÃO DA SOLUBILIDADE DAS PROTEÍNAS
a) Influência da temperatura
Método: Em um tubo de ensaio adicionou-se 2mL de solução de proteína a 10% e aquecido em banho-maria fervente por 3min.
Resultado: Observou-se a formação de um soro branco em uma solução que antes era límpida e incolor.
Discussão: Sabe-se que altas temperaturas constituem-se em agentes desnaturantes de proteínas, ou seja, as levam a perder sua conformação nativa.
b) Influência de ácidos fortes
Método: Em um tubo de ensaio, colocou-se 1mL de solução de proteína a 10% e adicionou-se 3mL de ácido cítrico concentrado.
Resultado: Observou-se uma solução amarela com material suspenso (aglutinação).
Discussão: Extremos de pH também conferem desestabilização à molécula de proteína desnaturando-a. Vale ressaltar que o pH como agente desnaturante deve ser