Penicilina

CITOMETRIA DE FLUXO

A citometria de fluxo mede as propriedades das células suspensas num meio fluido em movimento. Todas as células passam em fila única através de um ponto sensor, onde elas são interceptadas tipicamente por um feixe a laser de argônio seja de água ou ar resfriado. Aluz transmitida consiste de ambos, luz dispersa (para frente e 90º) e luz fluorescente. A luz é direcionada por lentes e focalizada no PMT apropriado. Um sinal análogo ao PMT é convertido num sinal digital que o computador pode usar para quantificação.

COMPONENTES DE UM CITÔMETRO DE FLUXO

Um citômetro de fluxo típico baseado em laser inclui um sistema de transporte de células, uma fonte de luz a laser., uma câmera de fluxo, filtros monocromáticos, lentes,espelhos dicróicos, tubos fotomultiplicadores e um computador para a análise dos dados. As amostras da serem analisadas são preparadas dependendo da fonte e elas são suspensas num meio. As alíquotas da suspensão de células são introduzidas na câmara de fluxo usando pressão. Esta corrente de fluido externo cria um fluxo laminar forçando a amostra para o centro, e resulta num alinhamento de fila única das células individualmente. Este processo é conhecido com enfoque hidrodinâmico. Cada amostra de célula é interpretada por um feixe de laser. O dispersor de luz para frente está relacionado ao tamanho dos grãos e densidade das células. Se as células forem rotuladas com fluocromos comerciais são disponíveis dentro do espectro inteiro ultravioleta e espectro visível. O espectro de excitação e emissão de cada fluorocromo, e o comprimento de onda de excitação e emissão nas mensurações. O dispersor de luz inteira é direcionado para o fotodetector de dispersão para frente. No ângulo reto do feixe de laser estão os espelhos que dividem o dispersor de luz em ângulo reto entre os tubos remanescentes fotomultiplicadores (detector de dispersão de ângulo reto e detectores de fluorescência). A análise simultânea do dispersor de luz para