paracitologia

Etec Amim Jundi
Técnico em Farmácia – 2° Módulo
Parasitologia – Professor Renê

ANÁLISE DE AMOSTRAS DE URINA PELO MÉTODO DE GRAM

Beatriz Moura n°05
Jady Zardi n°13
Renata Mucillo n°26

1 – Introdução

A coloração de Gram é um método de coloração de bactérias desenvolvido pelo médico dinamarquês Hans Christian Joachim Gram em 1884. O método consiste no tratamento de uma amostra de uma cultura bacteriana com um corante primário, o Cristal Violeta, seguido do tratamento com um fixador, o Lugol.
Tanto bactérias Gram-positivas quanto Gram-negativas absorvem o corante primário e o fixador, adquirindo uma coloração violeta.
Segue-se um tratamento com um solvente orgânico, o álcool, que dissolve a porção lipídica das membranas externas das bactérias Gram-negativas, removendo a coloração violeta, e desidrata as paredes celulares das bactérias Gram-positivas, retendo o corante primário e tornando-as impermeáveis.
Em seguida, a amostra é tratada com um corante secundário, a Fucsina.
Ao observar a amostra no microscópio, as células Gram-positivas aparecerão coradas em violeta, enquanto as Gram-negativas estarão coradas de vermelho ou rosa escuro.

Apostila de Microbiologia – Luciana Kimura

2 – Materiais e Reagentes

Materiais:
Cultura de urina em PCA;
Bico de Bunsen;
Alça de Platina;
Lâminas;
Microscópio.

Reagentes:
Cristal Violeta;
Lugol;
Álcool 98,2° GL;
Fucsina de Gram;
Óleo de Imersão.

3 – Metodologia

Para realizar o esfregaço:

Deve-se flambar a alça de platina no bico de bunsen e esfriá-la em um béquer com água destilada. Em seguida deve-se colher a amostra de uma das colônias de bactérias e esfregar a alça de platina na lâmina. Depois se flamba novamente a alça de platina e fixa o esfregaço na lâmina passando-a rapidamente sobre a chama.

Para realizar a coloração de Gram:
1) Cobrir o esfregaço com Cristal Violeta durante 1