Microbiologia - Meio de cultura e coloração
Coloração de Gram: o tratamento sucessivo de um esfregaço bacteriano, fixado pelo calor, com os reagentes: cristal violeta, lugol, etanol-acetona e fucsina básica. Essa técnica permite a separação de amostras bacterianas em Gram-positivas e Gram-negativas e a determinação da morfologia e do tamanho das amostras analisadas.
O método da coloração de Gram é baseado na capacidade das paredes celulares de bactérias Gram-positivas de reterem o corante cristal violeta no citoplasma durante um tratamento com etanol-acetona enquanto que as paredes celulares de bactérias Gram-negativas não. Quando examinadas ao microscópio ótico, usando objetiva de imersão, as bactérias gram-negativas aparecem coradas de vermelho(rosa) e as gram-positivas de roxo (violeta azulado). Soluções em ordem de aplicação Gram positivas Gram negativas
1- Cristal violeta - CV Células coradas em violeta Células coradas em violeta 2- Solução de iodo (lugol) - I Formação do complexo CV-I no interior das células, que permanecem violetasFormação do complexo CV-I no interior das células, que permanecem violetas3- Álcool Desidratação das paredes celulares, diminuição da porosidade e da permeabilidade: o complexo CV-I não pode sair das células que permanecem violetas. Extração dos lipídios da parede celular, aumentando a porosidade: O complexo CV-I é removido das células4- SafraninaAs células não são afetadas, permanecendo violetas. As células tomam o corante, tornando-se vermelhas.
Controle de população microbiana (assepsia)
Um antisséptico ideal deve ser capaz de destruir a forma vegetativa de todos os microrganismos patogênicos, requerer tempo limitado de exposição e ser eficaz em temperatura ambiente, não-corrosivo, atóxico para seres humanos e de baixo custo. Entretanto, a toxidade seletiva (a toxidade seletiva para alguns microrganismos, mas não para as células humanas) é de suma importância para os antissépticos. O grau de seletividade