Genética

Questionário 2 – Replicação do DNA
1. O que é replicação semiconservativa?
A replicação do DNA é um processo semiconservativo, pois cada uma das suas moléculas recém formadas conserva uma das cadeias da molécula que a originou e forma uma cadeia nova, complementar ao seu molde.
A replicação do DNA envolve três etapas:
Iniciação
Ampliação ou alongamentoTérmino 2. Como Meselson e Stahl demonstraram que a replicação é semiconservativa?
Meselson e Stahl cultivaram bactérias Escherichia coli num meio de cultura enriquecido com um isótopo pesado de azoto 15N, em vez do usual 14N mais abundante e com menor massa. Devido às suas diferentes massas estes dois isótopos podem ser separados por centrifugação, o que permitiria aos investigadores separar moléculas de DNA que incorporassem diferentes isótopos. As bactérias E. coli cresceram durante várias gerações no meio com 15N e após extracção do DNA destas células, e centrifugação do mesmo, verificaram que tinha densidade superior ao DNA de bactérias a crescer em meio contendo 14N. Numa segunda fase, bactérias E. coli originalmente a crescer em meio com 15N foram transferidas para um meio com 14N, permitindo-se que realizassem apenas uma divisão celular, com a replicação correspondente do seu DNA. Novamente, o DNA foi extraído e centrifugado. Quando compararam as densidades dos três grupos de DNA extraídos (14N, 15N e 15N - 14N) verificaram que a densidade do DNA das bactérias que tinham crescido nos dois meios (primeiro em 15N e depois 14N) era intermédio do DNA de E. coli cultivado apenas em meios simples de 14N ou 15N (densidade do DNA extraído:14N DNA