Extração de DNA (morango)

666 palavras 3 páginas
RELATÓRIO AULA PRATICA
Extração de DNA
Introdução:

A molécula de DNA é conhecida como a molécula da hereditariedade, pois dentro dela estão contidas todas as informações genéticas das quais o novo indivíduo necessita para ser formado.
Os morangos são bons experimentos de extração de DNA, pois são fáceis de macerar e homogeneização, quando maduros produzem pectinases e celulases, que são as respectivas enzimas que degradam pectina e celulose, sendo polissacarídeos. Além disso, os morangos atuais são octaplóides, possuem 8 conjuntos de 56 cromossomos em cada célula.

Materiais:

Morangos maduros
Pistilos
Tubos de ensaio de 50 mL
Backers
Filtro de papel ou peneira
Funis
Detergente doméstico
Sal de cozinha
Álcool absoluto (retirado de congelador),
Bastão de vidro ou de madeira

Métodos:

1- Preparar soluções:
1.1- Solução de Lise: Em 20 mL de água destilada, acrescentar 2 mL de detergente neutro, 1 gramas de NaCl (Cloreto de sódio).
2- Macerar um Morango no pistilo,
3- Passar o macerado de morango para o tubo de ensaio,
4- Acrescentar 20 mL da Solução de Lise,
5- Homogeneizar suavemente sem fazer bolha por 15 minutos,
6- Filtrar toda a solução em papel filtro transferindo para outro tubo de ensaio,
7- Colocar delicadamente 10 mL do Álcool gelado, sem misturar. De forma a obter duas fases.
8- centrifugar 2 minuto a 2000 RPM (contrabalancear a centrífuga).
9- O DNA será visto no sobrenadante como uma massa branca.
10- Com a ajuda de um bastão de vidro, pode-se “pescar” os filamentos com movimentos giratórios.

Perguntas e resposta:

1)Porque é necessário macerar?
Para aumentar a superfície de contato da solução de Lise. 2) Qual a função do detergente, do NaCl e do Álcool?
Detergente: Degradar a membrana fosfolipídica.
NaCl: neutraliza a carga negativa do DNA.
Alcool: Como o DNA é insolúvel em álcool gelado, portanto fazendo ficar visível e aglomerado em seu contato. 3) Qual a composição da membrana celular que

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