Etapas da mitose

PREPARAÇÃO DE LÂMINAS DE PONTA DE RAIZ DE CEBOLA PARA ESTUDO DE MITOSE

Introdução

As pontas de raiz de cebola, por serem material fácil de obter e por apresentarem crescimento acelerado, são excelentes para o estudo da MITOSE. A fixação é importante para a estrutura interna e impedir alguma modificação da composição química ou da forma dos componentes do material em estudo. O corante evidencia estruturas pelas quais tem afinidade. Corantes básicos são usados para observações cromossômicas por serem os ácidos nucléicos os componentes celulares mais basófilos. Carmim-acético, Orceína-acética, Feugen e Giemsa são corantes mais comumente empregados. Segue-se s hidrólise, para tornar o tecido macio e de fácil esmagamento. Os corantes acéticos funcionam também como hidrolissadores. No caso da coloração Feugen, usa-se ácido clorídrico. A hidrólise não deve ser muito prolongada, pois pode levar à desintegração de todo tecido.

OBJETIVO Preparar lâminas de ponta de raiz de cebola para a observação de mitose
MATERIAL
Microscópio Água destilada Orceína acética Lâminas e lamínulas Ponta de raiz de cebola HCI 5N

PROCEDIMENTO
1- Obter bulbos de cebola roxa em bom estado. Cortar as raízes secas, Espetar de 3 a 4 palitos no bulbo, de forma a sustentá-lo na boca de um copo com água da torneira, até tocar no que restou das raízes. Deixe em repouso por alguns dias, ate obter raízes de 1 a 2cm.
2- Num recipiente tampado, hidrolise as raízes com HCI 5N por 20 minutos (o HCI é volátil ).
3- Transferir as raízes para um recipiente com água destilada enquanto preparamos as lâminas.
4- Colocar uma ou duas coifas em um lâmina e com um bastão macerar elas levemente para obtermos células mais individualizadas. Colocar uma ou duas gotas de Orceína acética e deixar corar por 5 minutos.
5- Cobrir com a lamínula; Comprimir suavemente o conjunto de