ESPECTROFOTOMETRIA

Roteiro de aula prática – ESPECTROFOTOMETRIA (Aula prática 02)
Equipe: ...

1 – Determinação do espectro de absorção

1.1 – Objetivo: determinar a absorbância máxima das substâncias analisadas.

1.2 – Marcha analítica
1.2.1 – Preparar as soluções dos corantes de Azul de Bromofenol (ABF) e de Alaranjado de Metila (MO) na concentração de 1mg/ml . Fazer uma diluição de 1:100 com água deionizada para que a solução final forneça uma leitura de A= 500 (calibração). Usar λ Max. de 580 e 460 nm para ABF e MO, respectivamente.
1.2.2 – Utilizando água como BRANCO, fazer leituras de absorção no intervalo de 400 a 700 nm, a intervalos de 20 nm.

 (nM)
Abs
ABF

ABF
T(%)
Abs
MO
MO
T(%)
400

420

440

460

480

500

520

540

560

580

600

620

640

660

680

700

1.2.3 – Utilizando os dados da tabela acima preparar um gráfico ( x = comprimento de onda nm )e (y = leitura em absorbância), encontrando qual o comprimento de onde refere-se ao pico de absorção do corante usado em aula.

Abs Abs ABF MO

Qual o comprimento de onda correspondente ao Pico de absorção da luz?
ABF ____________ MO___________

2 – Identificação do ABF numa mistura de corantes

2.1 – Objetivo: Determinar a presença de uma substância em uma mistura de corantes.

2.2 – Marcha analítica
2.2.1 – Misturar 2,5 ml de solução de ABF e 2,5 ml de solução de MO. Determinar a Absorbância nos comprimentos de onda (λ) de 415, 445, 460, 490, 520, 535, 550, 580, 610 e 640 nm.
2.2.2 – Lançar em gráfico as leituras de (A x λ) e analisar o resultado.

Abs