Enfermagem

ROTEIRO AULA TEÓRICO-PRÁTICA 1

MICROBIOLOGIA

MÉTODOS DE ESTUDO PARA

DIFERENCIAÇÃO E IDENTIFICAÇÃO DE MICRORGANISMOS

MÉTODOS DIRETOS

MICROSCOPIA

Método usado para observação de bactérias, fungos e protozoários. Os vírus são vistos pela microscopia eletrônica.

Microscópio Ótico

- Aumento da imagem por um jogo de lentes, forte iluminação e visão translúcida do microrganismo.

A microscopia pode ser realizada:

a) Microscopia a fresco: para material a fresco (recente) a fim de observar os microrganismos; o material é colocado entre lâmina e lamínula;

b) Microscopia de gota pendente: para examinar organismos vivos que tem a sua morfologia facilmente distorcida; material é colocado em uma lâmina escavada sobreposta com uma lamínula. Apresenta menor desidratação;

c) Microscopia corada: material é colocado sobre uma lâmina e posteriormente corado.

Técnicas de coloração

Para as bactérias, as técnicas coloração podem ser simples (azul de metileno, Giemsa), ou diferenciais. A técnica de coloração diferencial mais utilizada é a de Gram. Algumas bactérias, como a causadora da tuberculose (M. tuberculosis) e a bactéria causadora da hanseníase (M. hansen) se coram somente com uma coloração especial (Ziehl-Neelsen).

Coloração de gram

Princípio: As células que retém o complexo cristal violeta iodo após a lavagem com o solvente, apresentando cor violeta escura, são denominadas gram positivas. As células que não retém o corante após a ação do solvente são denominadas gram negativas. Essas células descoradas quando tratadas com o segundo corante (fucsina ou safranina), chamado de corante de contraste, adquirem coloração rosa ou vermelha.

Atividade Prática:

- Preparar uma lâmina a partir de uma colônia de crescimento de cultura;
- Realizar o procedimento de coloração de Gram;
- Após secagem da lâmina, observar ao microscópio óptico em lente de imersão.
- Observar as lâminas coradas