DISTINÇÃO DE Candida albicans e C. dubliniensis ATRAVÉS DE MARCADOR MOLECULAR ESPÉCIE-ESPECÍFICO.

Leveduras do gênero Candida incluem os principais patógenos causadores das micoses oportunistas. Elas podem ser isoladas em condições sapróbias na mucosa oral, vaginal e trato gastrintestinal de humanos, bem como no solo e frutas. C. albicans prevalece nas infecções hospitalares e C. dubliniensis na cavidade oral de indivíduos infectados com Vírus da Imunodeficiência Humana - HIV. Diversas características fenotípicas e bioquímicas são semelhantes entre estas espécies, contudo apresentam-se genotipicamente distintas, sendo relevante a aplicação de técnicas moleculares consistindo de um rápido e eficaz método de diferenciação entre C. albicans e C. dubliniensis. Esta pesquisa teve como objetivo utilizar a técnica de Reação em Cadeia da Polimerase - PCR para identificação de seis espécies de C. albicans e seis de C. dubliniensis. As amostras foram obtidas na Coleção de Culturas Micoteca URM -Universidade de Recife Micologia, do Departamento de Micologia, Centro de Ciências Biológicas, Universidade Federal de Pernambuco. Foram identificadas através do método clássico de acordo com as características macroscópicas, microscópicas e fisiológicas. Foi realizada a extração do DNA nuclear de cada isolado e analisado quanto ao tamanho do produto de amplificação por PCR do locus ITS1-5.8S-ITS2 de DNA ribossomal e pela presença ou não do fragmento de amplificação utilizando os iniciadores espécie-específicos desenvolvidos para a identificação de C. albicans. O produto de amplificação da seqüência interna transcrita – ITS do rDNA com os iniciadores ribossomais ITS4 e ITS5 de todos os isolados, gerou um fragmento de 550pb. Todas as amostras de C. albicans e C. dubliniesnis amplificaram com o marcador espécie-específico utilizando os iniciadores Calb1 e Calb2. Sendo assim, as amostras de C. dubliniensis foram reidentificadas como C. albicans. Estas técnicas moleculares auxiliam a identificação taxonômica clássica, constituindo-se em ferramentas apropriadas para caracterização