Determina O De Prote Nas Totais

DETERMINAÇÃO DE PROTEÍNAS TOTAIS

FINALIDADE

Sistema colorimétrico para determinação de proteínas totais no soro e outros líquidos biológicos (pleural, ascítico, pericardico e sinovial).

PRINCÍPIO

O reagente do Biureto, uma solução de Sulfato de Cobre, Citrato trissódico, Carbonato de Sódio e Hidróxido de Sódio, reage com as proteínas da amostra, formando um complexo corado de cor violeta, que é proporcional à concentração proteica da amostra.

PARTICULARIDADES DO SISTEMA

O reagente de Biureto modificado, isoladamente, não reage com as proteínas. Só após sua alcalinização dá-se o desenvolvimento de reação corada. Esse detalhe permite a dosagem em série de inúmeros soros. Particularidades na formulação do reagente de biureto permitem que a reação corada se desenvolva integralmente em 10 minutos.

MATERIAIS E MÉTODOS

Materiais:
•Água destilada
•Tubos de ensaio
•Kit para detecção de proteína
•Espectrofotômetro
•Banho Maria
•Pipetas
•Ponteiras descartáveis
•Amostra

Métodos:
1. Inicialmente deve-se tomar 3 tubos de ensaio e pipetar conforme o quadro abaixo:
Tubo
Amostra
Padrão
Água destilada
Biureto
Branco
0
0
20 µL
1,0 mL
Amostra
20 µL
0
0
1,0 mL
Padrão
0
20 µL
0
1,0 mL

2. Após, deve-se misturar e incubar os tubos de ensaio em Banho Maria a 37°C durante 10 minutos.
3. Em seguida, determinar as absorbâncias do teste e do padrão , ajustando o espectrofotômetro em 545 nm (530 a 550 nm), acertando o zero com o tubo de ensaio branco.
A cor é estável durante 1 hora.

RESULTADOS

Tubo
Absorbância
Branco
0 nm
Amostra
276 nm
Padrão
199 nm
CÁLCULO:

Proteínas (g/dL) = 276 x 4 = 5,55 g/dL 199

VALORES DE REFERÊNCIA

Soro: 6,0 a 8,0 g/dL.

SIGNIFICADO CLÍNICO

As proteínas totais apresentam-se aumentadas em casos de: desidratação, mieloma múltiplo, macroglobulinemia, crioglobulinemia, lupus eritematoso sistêmico, cirrose hepática, sarcoidose, linfogranuloma e leishmaniose visceral.
As proteínas totais apresentam-se diminuídas em