AVALIAÇÃO DA ATIVIDADE INIBITORIA DO PEPTIDEO Z EM CÉLULAS NEOPLÁSICAS

AVALIAÇÃO DA ATIVIDADE INIBITORIA DO PEPTIDEO Z EM CÉLULAS NEOPLÁSICAS

Introdução O câncer se origina em decorrência de vários eventos, onde células normais tornam-se um tumor podendo ser ele maligno ou benigno. O desenvolvimento dessa doença pode ser dividido em três etapas: iniciação, promoção e progressão. É necessário que estas etapas ocorram nesta sequencia para que o câncer chegue a seus estágios mais críticos, no caso um tumor maligno com metástase. Os genes responsáveis pela suprimir tumores são recessivos, sendo assim precisa de mutação nos dois pares de alelos. Já os oncogenes são dominantes e só precisão de uma mutação para ocorra divisão celular descontrolada. Para que o tumor aconteça devem ocorrer alterações essenciais são eles : autossuficiência de fatores de crescimento, insensibilidade aos inibidores de crescimento, angiogênese aumentada para nutrir a massa tumoral, evasão a apoptose, potencial ilimitado de replicação celular, invasão tecidual conseguindo ganhar os vasos, levando a uma disseminação a distancia ( metástase).

Objetivo

O experimento em questão visa, comprovar a ação do peptídeo Z na inibição da atividade da enzima Y, responsável pela expansão clonal de células cancerosas, desta vez em in vivo, considerando que sua ação já foi testada in vitro. Matérias e Métodos

Foi utilizado meio de cultura RPMI, células de câncer de mama, células normais de mesma origem, trypan blue, câmara de CO2, microscópio marca X modelo Y, marcadores FITC (verde), PE ( amarelo) e APC (vermelho), peptídeo Z. Foram utilizados três testes, o primeiro teve o objetivo de encontrar a DL50, onde foram utilizados placas em triplicata contendo 106 células e pipetou 100uL de solução do peptídeo nas concentrações finais 50ng/uL, 100ng/uL, 200ng/uL, 400ng/uL, 500ng/uL, e 1000ng/uL. Foi incubado por 48h a 37ºC e 5% de CO₂, as células vivas foram coradas com trypan blue e contadas