Aula Pr Tica 6 Inibi O

Disciplina: BIOQUÍMICA
Profª FERNANDA COUTINHO RETONDARO BARBOSA

AULA PRÁTICA 6:

A) INIBIÇÃO ENZIMÁTICA:

Fundamento: A enzima alfa-amilase secretada pelas glândulas salivares e pelo pâncreas, é responsável pela quebra do amido em açucares simples que são absorvidos no intestino delgado. O bloqueio desta enzima digestiva pode impedir a digestão de carboidratos complexos.
A faseolamina, é uma glicoproteína extraída do feijão branco comum (Phaseolus vulgaris) e atua como inibidor da enzima digestiva alfa-amilase, o que provoca uma diminuição no número de calorias absorvidas, potencialmente promovendo perda de peso.

Material: tubos de ensaio, pipetas de 5mL, pipetas de 1 mL, banho-maria a 37ºC.

Reagentes: solução de amido 1%, saliva in natura, faseolamina 1%,e 5% reativo lugol (solução de iodo).

Procedimento:

Preparo da Enzima:

Amilase salivar (diluição 1:5): Colocar 1 mL de saliva in natura em um becher de 50 mL e, a seguir, adicionar 4 mL de água destilada (diluição 1:5) e homogeneizar manualmente.

Seguir com o procedimento abaixo:

- Numerar 5 tubos de ensaio e adicionar em cada tubo:

- Tubo 1: 1 ml de água destilada
- Tubo 2: 1 ml de solução de amilase salivar (diluída 1:5)
- Tubo 3: 1 ml de solução de amilase salivar (diluída 1:5) e acrescentar 1 mL de faseolamina 1%
- Tubo 4: 1 ml de solução de amilase salivar (diluída 1:5) e acrescentar 1 mL de faseolamina 5%

- Homogeneizar e incubar os tubos em banho-maria a 37ºC por 20 min.
- Em seguida, adicionar 0,5 mL de amido 1% em todos os tubos e incubar em banho-maria a 37ºC por 10 min. Após o tempo de incubação, adicionar 1 gota do reativo lugol em cada tubo. Observar e anotar o que ocorreu.

B) ESPECIFICIDADE ENZIMÁTICA:

Fundamento: As reações químicas conduzidas pelos organismos vivos são, na sua grande maioria, catalisadas enzimaticamente, tornando a velocidade das mesmas compatíveis com as exigências metabólicas. Cada enzima possui uma organização estrutural