Artigo Imuno Antraxis Aglutination Jos Fernandes e Jos Mateus
377 palavras
2 páginas
“Development of a simple and rapid method for the specific identification of organism causing anthrax by slide latex agglutination”Letters in Applied Microbiology
T.G. Sumithra1, V.K. Chaturvedi2, P.K. Gupta2, S.C. Sunita2, A.K.
Rai2, M.V.H. Kutty2, U. Laxmi2 and M.S. Murugan2
26 Novembro 2013
Mestrado Integrado em Ciências Farmacêuticas
Imunologia
Apresentação realizada por:
José Fernandes
José Mateus
Introdução: o que é o Anthrax?
• Bacillus Anthracis;
• Resistente a condições extremas;
• Nova arma biológica.
Tipos de infeção por Anthrax:
•
•
•
Cutâneo;
Gastrointestinal;
Respiratório.
Introdução: composição da toxina
A toxina do B. Anthracis é composta por 3 proteínas:
• Antigénio Protetor;
• Fator Edema;
• Fator Letal.
Diagnóstico de Anthrax
• Métodos tradicionais:
• Requer vários dias;
• Não é especifico;
• Não é possível realizar em campo.
• Métodos mais recentes:
•
•
•
•
São específicos;
Protocolos complicados;
Dispendiosos;
Conhecimento cientifico e experiencia. Objetivo
Desenvolvimento de um método simples e rápido para a deteção especifica do organismo que causa Anthrax por Aglutinação Lateral.
Material/Métodos
• Estirpe Bacterial;
• Coelhos e porcos da India;
• Preparação do Antigénio recombinante (rPA);
Protetor
• Preparação do soro hiperimune para revestir as esferas de latex;
• Preparação das partículas de Latex;
• Preparação das partículas de Latex com o soro hiperimune Anti-PA;
• Preparação da Aglutinação Lateral.
Resultados
Fig1:
Confirmação da amplificação do gene que produz a toxina ativa de
Anthrax.
Fig2: Confirmação da células onde o gene foi inserido.
Figura 1
Figura 2
Resultados
SDS-PAGE: confirmar que o rPA foi expressado corretamente.
Western Blot: confirmar identidade do rPA.
Figura 3A: SDS-PAGE
Figura 3B: Western Blot
Resultados
4.1 A
4.1 B
• 4.1) Teste de especificidade
• A- Positivo (+)
• B- Negativo (-)
4.2 A
4.2 B
4.2 C
4.2 D
• 4.2) Todos resultados (+)
•
•
•
•
A- 5x107 CFU
B- 5x105 CFU
C- 5x104