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ANÁLISE DE AERÓBIOS MESÓFILOS EM ALIMENTOS
Objetivos

Determinar o número de micro-organismos aeróbios mesófilos em uma amostra de alimento.

Materiais

Amostra

Meios de cultura e soluções:

- PCA em placa;
- Água peptonada em erlenmeyer (225 mL)
- Água peptonada em tubos (9 mL).

Equipamentos e utensílios

- Estufa bacteriológica à 35°C;
- Bico de Bunsen;
- Pipetas estéreis;
- contador de colônias.

Procedimentos

a. Diluições seriadas:

- Diluição da amostra (10-1): adicionar 25 g ou mL da amostra em um erlenmeyer contendo 225 mL de água peptonada estéril. Agitar o vigorosamente o frasco.
- Diluições 10-2: adicionar 1 ml da diluição 10-1 em solução em 9 ml de água peptonada estéril.
- Diluições subsequentes: adicionar 1 ml da diluição anterior em 9 ml de água peptonada estéril e repetir o processo até a diluição necessária (usar padrão microbiológico da RDC nº12 como referência).

Obs.: utilizar uma pipeta para cada diluição.

b. Técnicas:

1. Spread plate:

- identificação das placas (triplicata) de acordo com as diluições definidas (10-3, 10-2 e 10-1, por exemplo);
- adição de 0,1 ml de cada diluição em sua respectiva placa contendo meio;
- espalhar o inóculo sobre a superfície da placa com auxilio de uma alça de Drigalsky;
- inverter as placas e incubá-las a 35°C/48h.

Resultados
Após a incubação, retirar as placas da estufa e efetuar a contagem das colônias, utilizando um contador de colônias. Registrar as contagens em placas para cada diluição, preferindo as que apresentam numero de colônias compreendido entre 20 e 200. Calcular a concentração média (triplicata), de contagem. O valor é expresso em UFC/ml. No caso da técnica de spread plate (alíquota de 0,1 ml), o resultado expresso deve ser multiplicado por 10. Comparar o resultado obtido com o padrão microbiológico contido na RDC nº 12.