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Resumo de trabalho sobre Dengue

AVALIAÇÃO DE TESTES LABORATORIAIS PARA O DIAGNOSTICO DE DENGUE EM CLÍNICA AMOSTRAS DE PACIENTES CONSECUTIVOS COM SUSPEITA DE DENGUE EM BELO HORIZONTE, BRASIL.

São Luís
2013

INTRODUÇÃO
A Dengue é uma infecção transmitida ao homem pela picada da fêmea do mosquito Anopheles é um vírus de RNA que contêm 4 genótipos com sorotipos geneticamente diferentes, classificados como dengue tipo I, II, III e IV, um diagnóstico preciso é fundamental para um manejo adequado dessa doença.Diagnóstico para detectar a infecção aguda por dengue, isolamento de vírus, PCR-RT, sequenciamento do genoma viral, detecção de antígeno viral e métodos sorológicos.
O presente estudo objetivou avaliar o desempenho do diagnóstico do PCR em tempo real e métodos sorológicos para dengue em um contexto de real epidemia.
METODOLOGIA
População e período do estudo Realizado de janeiro a março de 2010 em consecutivos pacientes suspeitos de dengue, maiores de 18 anos e que aceitaram participar da pesquisa.
Coleta e classificação das amostras
Os casos de dengue foram classificados de acordo com a Organização Mundial da Saúde e as amostras de sangue foram coletadas do dia da admissão do paciente (amostra aguda) e seis dias após a coleta (amostra de convalescência).
A positividade de dengue foi dada quanto havia presença de NS1 ELISA e/ou anticorpos IgM nos testes. A extração de RNA foi realizada utilizando um kit específico e a síntese do DNAc foi obtida usando um tampão padrão e o iniciador reverso 5’ GGGTCTCCTCTAACCTCTAGTCCT3’e o PCR-RT realizado.
A sensibilidade das amostras foi feita utilizando amostras positivas com isolamento prévio do vírus através da inoculação em células C6/36 A. Albopictus. As amostras agudas foram utilizadas para avaliar o desempenho da PCR-RT.
Três kits de fluxo lateral foram usados para detectar o antígeno NS1 em pacientes agudamente infectados e com amostras positivas em outros métodos, amostras agudas