01 Aula Prática relatório de Microbiologia
SEDE: Parque Ecológico
DISCIPLINA: Microbiologia I - 3º Semestre (2ª e 4ª AB)
PROFESSOR (A): Bruno Jaegger
ALUNOS: Eriosvaldo Alves Moreira, Luciana e Maria LÚCIA Moreira da Rocha
AULA / RELATÓRIO
Diferenciar bactérias Gram positivas(+) e negativas(-).
Amostra: mucosa oral
Técnica: coloração de Gram
Coloração diferencial - Permite diferenciar dois grupos distintos de bactérias G(+) e G(-)
Material:
- Lamina
- Lamparina
- Óleo de imersão
- Microscópio
- Abaixador de língua
- Corantes
Método
Passar o abaixador de língua na mucosa oral e espalhar o material, em movimentos circulares, na lâmina.
Fixar o material da lâmina usando a lamparina.
Cobrir a lâmina com uma solução de Cristal Violeta (1minuto) – Células coradas em roxo.
Lavar com água o esfregaço, deixando cobrir toda a lâmina.
Cobrir a lâmina com Lugol (1 minuto) – Células permanecem roxas.
Lavar com água novamente, deixando escorrer o Lugol.
Lavar a lâmina com a solução de descorante: Células Gram positivas continuaram roxas (Devido a parede celular das bactérias Gram positivas serem mais grossa, o que dificulta a sua descolorização). Células Gram negativas ficam em incolor (Devido a parede celular das bactérias Gram negativas serem mais fina, o que facilita a sua descolorização).
Lavar com água a lâmina.
Cobrir a Lâmina com corante de Safranina (30 segundos): Células Gram positivas continuaram roxas Células Gram negativas ficam com a cor rosa
Lavar com água a lâmina.
Seque a Lâmina com auxílio de um papel-filtro.
Aplique uma gota de óleo de imersão sobre o esfregaço e observe no microscópio com objetiva de 10x e de 100x.
Resultado
Coloração: Roxa – Bactérias gram positivas (+)
Morfologia: Com maior concentração de cocos Arranjo: Em pequenas cadeias diplococos