I Estudo de t cnicas
a. Técnica citoquímica – evidência substâncias, compostos químicos na célula.
b. Técnica histoquímica – evidência a química dos tecidos.
Ex. O Núcleo celular contém os Ácidos Nucléicos (DNA e RNA). A técnica utilizada para demonstrar a presença de DNA é a de FEULGEN, mostra a célula corada com pigmentos na cor púrpura. É possível encontrar DNA na cromatina (núcleo), centro celular (centríolo) e mitocôndria. Os espermatozoides corados por esta técnica demonstram grandes quantidades de pigmentação na região próxima ao flagelo, devido a grande quantidade de organelas nessa área.
Presença de mitocôndrias
Ex. Elementos formados por Carbono (C), Hidrogênio (H) e Oxigênio (O), ou seja, carboidratos.
Obs. No fígado as moléculas de glicose são armazenadas no formato de glicogênio
Técnica Ácido Periódico + Reativo de Schiff (PAS) – pode ser positivo ou negativo.
Ex. o tecido hepático (fígado) é formado pelos hepatócitos (células) e estás são as células no corpo humano com maior capacidade de armazenamento do glicogênio sendo visualizadas apenas a pigmentação relativa a marcação dessas moléculas. Citologia e Embriologia
Obs. A análise salivar reage com o glicogênio Citologia e Embriologia – Prof. Cláudio Costa
Técnica Histológica de rotina pelo método de H/E. o Hematoxilina – corante básico, cora o núcleo (basófilo) da célula (ácido) em azul – roxo. o Eosina – corante ácido, cora o citoplasma (acidófilo) celular em róseo avermelhado.
Obs. Basofilia Celular: área ácida do citoplasma celular que tem afinidade por corante ácido.
Etapas para coloração H/E
1º Obtenção: o Biotério (uso de animais) o Anestesiar com tionembutar – éter
2º Dissecar (dissecção)
3º Fixação o Imersão da amostra em solução de formol a 10% por 24 horas o A fixação coagula as proteínas mantendo a integridade morfológica do tecido e do órgão
4º Desidratação Citologia e Embriologia – Prof. Cláudio Costa
o Imergir a amostra em álcool 75%, depois álcool