B HCG

Aula prática n° 1.1 – Módulo II.

Objetivos:
O aluno deverá:
- Saber o preparo do paciente, para realização do ß-HCG.
- Realizar o exame: ß-HCG, pelo método de ELISA visual.
- Interpretar o resultado, bem como correlacioná-lo com a clínica.

Materiais necessários:
Kit de ELISA visual.
Kit de pipetas automáticas (10, 20, 25, 50, 100, 150, 200, 250, 500 e 1000 µL).
Ponteiras pequenas (amarelas) e grandes (azuis).
Gases.
Estantes azuis.
Soro e/ou urina do paciente, fracionados em 6 tubos pequenos.
Luvas P, M, G.
Agua destilada.
Relógio ou cronômetro.
Béquer com hipoclorito de sódio, para descarte do material biológico.

Procedimento prático:

Determinação semi-quantitativa (visual) da Gonadotrofina Coriônica Humana (ß-HCG), pelo Método Imunoenzimático (ELISA).

FUNDAMENTO

A Gonadotrofina humana (HCG) é um hormônio glicoproteico produzido pela placenta pouco depois da fertilização. Na gravidez, o HCG pode ser detectada tanto em urina como em soro a partir de 7-10 dias da concepção. Os níveis de HCG continuam aumentando rapidamente, superando as 100 mUI/mL e alcançando o máximo em torno de 100.000 - 200.000 mUI/mL nas 10-12 semanas de gravidez. A aparição de HCG na urina ou soro pouco depois da concepção e seu posterior aumento rápido durante o princípio da gestação converte a esse hormônio um excelente marcador para a detecção precoce da gravidez.

PRINCÍPIO DE AÇÃO

A Gonadotrofina coriônica humana presente no soro ou urina forma complexos com anticorpos anti HCG imobilizados em placa de poliestireno. Com a adição simultânea de um segundo anticorpo conjugado com peroxidase, específico para a cadeia beta, há formação de um complexo ternário com o HCG imobilizado. Após remoção dos anticorpos conjugados não ligados, através de lavagens, o complexo imobilizado é exposto a uma solução de 3,3.,5,5. Tetrametilbenzidina contendo água oxigenada a qual, sob a ação da Peroxidase imobilizada, produz uma coloração azul. A comparação visual da