Tecnologia da biologia celular e molecular

1. Introdução

A biologia celular e molecular estuda objetos muito pequenos, por isso depende inteiramente do aperfeiçoamento dos instrumentos e das técnicas de pesquisa. Os conhecimentos sobre as células progridem paralelamente ao aperfeiçoamento dos métodos de investigação. Inicialmente, o microscópio óptico, também chamado microscópio de luz, possibilitou o descobrimento das células e a elaboração da teoria de que todos os seres vivos são constituídos por células. Posteriormente, foram descobertas técnicas citoquimicas que possibilitaram a identificação e localização de diversas moléculas constituintes das células, com o advento dos microscópios eletrônicos que tem grande poder de resolução, foram observados em maiores detalhes a estrutura celular que não poderiam ser vistos pelos microscópios ópticos. Mais ou menos simultaneamente com o uso dos microscópios eletrônicos, foram aperfeiçoados métodos para a separação de organelas celulares para o estudo in vitro de suas moléculas e respectivas funções.

2. Confecção de cortes para estudo nos microscópios óptico e eletrônico.

Muitas vezes há vantagem em obter um preparado permanente (lâmina), no qual as células ficam fixadas e coradas, para melhor demonstração dos seus componentes. Um preparado ideal deveria mostrar as células com a mesma estrutura microscópica e composição química que possuíam quando vivas, mas isso não é possível, e todos os preparados apresentam artefatos (alterações produzidas nas células pelas técnicas utilizadas). Fixação é a primeira fase para obter um preparado permanente e tem as seguintes finalidades: - evitar a autólise ( destruição da célula por suas próprias enzimas); - impedir a atividade e proliferação de bactérias; - endurecer as células para que elas resistam melhor às etapas seguintes; - aumentar a afinidade das estruturas