ROTEIRO PR TICA 02 PROTE NAS 1

UNIVERSIDADE FEDERAL DO ESPÍRITO SANTO
CENTRO DE CIÊNCIAS DA SAÚDE
DEPARTAMENTO DE CIÊNCIAS FISIOLÓGICAS
Disciplina Bioquímica e Biofísica A
Prof. Dra. Patrícia Machado Bueno Fernandes
2015/1

PRÁTICA 02 – Propriedades Físico-químicas das Proteínas
EXPERIMENTOS
Albumina
Caseína
1- Precipitação por ácido forte

2- Precipitação Salina

3- Precipitação por solventes orgânicos:
a) Acetona;
b) Álcool.

4- Precipitação por sais de metais pesados

5- Influência da temperatura na solubilização de proteínas

Experiência 1 - Precipitação por ácido forte:
1.1. Colocar em tubo de ensaio cerca de 1,0 mL de solução de proteína;
1.2. Após agitação cuidadosa, adicionar lentamente pelas paredes do tubo cerca de 0,5 mL de ácido nítrico concentrado – CUIDADO NÃO PIPETAR
1.3. Interpretar os resultados.

Experiência 2 - Precipitação salina
2.1. Colocar num tubo de ensaio cerca de 1,0 mL de solução de proteína,
2.2. Após agitação cuidadosa, adicionar lentamente 2,0 mL de solução saturada de sulfato de sódio;
2.3. Interpretar os resultados.

Experiência 3 - Precipitação por solventes orgânicos
3.1. Adicionar num tubo de ensaio cerca de 1,0 mL de solução de proteína;
3.2. Agitar moderadamente e colocar ao tubo cerca de 1,0 mL de acetona gelada;
3.3. Repetir o experimento utilizando álcool gelado
3.4. Interpretar os resultados estabelecendo a relação principalmente com o resultado do experimento II.
Experiência 4 - Precipitação por sais de metais pesados
4.1. Adicionar a um tubo de ensaio cerca de 10 mL de proteína e 1,0 mL de água destilada;
4.2. Adicionar lentamente 0,5 mL de solução de acetato de chumbo a 5%;
4.3. Interpretar os resultados obtidos.

Experiência 5 - Influência da temperatura na solubilização de proteínas
5.1. Colocar num tubo de ensaio cerca de 1,0 mL de solução de proteína,
5.2. Levar o tubo contendo a solução protéica a um banho fervente por 2 min.
5.3. Interpretar os resultados.