Relatório

RELATÓRIO – Extracção de ADN de células da banana

-----------------------

OBJECTIVOS

Os objectivos da realização desta actividade labarotarial foram:

-Extracção do ADN das células da banana;

-Visualização do ADN das células da banana;

-Aprendizagem das técnicas de extração/isolamento do ADN adaptadas a células eucarióticas vegetais.

-Registo dos Resultados Obtidos

DISCUSSÃO DOS RESULTADOS OBTIDOS

Após a finalização da experiência e de aguardar alguns minutos, no tubo de ensaio observava-se nitidamente um aglomerado de matéria branca. O aglomerado de matéria branca era o ADN (associado a este, provavelmente também existiam algumas proteínas membranares). No entanto, também eram observáveis bolhas na superfície da solução que continham moléculas de água.

Para proceder ao isolamento do ADN das células foi necessário ter em conta as propriedades químicas e físicas dos constituintes celulares e estruturas existentes nas mesmas.

O esmagamento da banana e a agitação da vareta proporcionaram o rompimento da parede celular, da membrana celular e da membrana nuclear. A utilização de água quente permitiu a desnaturação das enzimas responsáveis pela hidrólise do ADN devido à exposição a condições diferentes àquelas em que foram produzidas. A adição de detergente permitiu a separação das proteína e emulsão dos fosfolípidos que integram na composição das membranas celular e nuclear ajudando deste modo a libertar o material nuclear da célula.

Devido à dissociação do cloreto de sódio em iões Na+ e Cl- quando este se encontra numa solução e à carga positiva que as proteínas membranares obtiveram após a exposição ao detergente, a adição deste permite que as proteínas em vez de atraírem o grupo fosfato do ADN, que possui carga negativa, atraiam antes os iões de Cl- ajudando deste modo a manter as moléculas de ADN e a permitir a sua agregação.

A coação e filtração permitiram remover os resíduos celulares e isolar o ADN.

A adição de álcool