Relatório Técnica Inoculação

Técnicas de Inoculação: Pour Plate e Spread Plate

Montes Claros
Abril 2014
RELATÓRIO DE AULA PRÁTICA

1 – OBJETIVO
Realizar inoculação para quantificação microbiana utilizando as técnicas Pour Plate (plaqueamento em profundidade) e Spread Plate (plaqueamento por espalhamento).

2 – INTRODUÇÃO

Os microrganismos tal como outros organismos vivos necessitam de obter os nutrientes apropriados do seu meio ambiente. Assim se queremos cultivar e manter microrganismos vivos em laboratório, necessitamos de colocá-los em meios de cultura, contendo os nutrientes apropriados para o seu crescimento. Para além de nutrientes é igualmente necessário que as condições de oxigénio (presença ou ausência), PH e pressão osmótica sejam adequadas ao crescimento desses microrganismos. Na preparação dos meios e na manutenção das culturas de microrganismos é importante observar as necessárias condições de assepsia, de modo a se evitarem contaminações com outros microrganismos. Os meios de cultura dividem-se primeiramente em meios sólidos, aqueles que contêm ágar, e meios líquidos, sem ágar. Ambos os meios são preparados com água destilada, aquecidos até que se dissolvam completamente e posteriormente esterilizados por autoclavagem a 121ºC. Um dos meios mais utilizados na pratica da Microbiologia é o AST ou TSA (trypticase soy ágar), que é um meio não seletivo onde crescem diferentes espécies de bactérias. O meio é rico em triptona e peptona, fonte de carboidratos, proteínas e lipídios para o desenvolvimento dos microrganismos verificados. Na microbiologia, são utilizados vários tipos de técnicas com o intuito de definir o tamanho do crescimento microbiano. As culturas em meio sólido são convenientes para isolamento de colónias de bactérias. As colónias de diferentes espécies de bactérias diferem no tamanho, forma, textura e cor. A cultura de bactérias em meio sólido faz-se por Spread Plate (esgotamento) ou por "pour plate" (incorporação). No