Relatório teste disco-difusão
O teste de disco-difusão é um dos métodos de suscetibilidade mais simples, confiável e mais utilizado pelos laboratórios de microbiologia. O seu princípio básico é a difusão do antimicrobiano na superfície do ágar, a partir de um disco impregnado com o mesmo antimicrobiano. É recomendado pela Organização Mundial da Saúde (OMS) para o teste de sensibilidade/resistência a antibióticos de bactérias Gram positivas e Gram negativas, aeróbicas ou anaeróbicas facultativas, comumente encontradas em alimentos e espécimes clínicos. O teste é feito utilizando-se discos de difusão antibióticos depositados sobre a superfície do meio onde se inoculou, por espalhamento, uma amostra de uma cultura bacteriana previamente crescida em meio líquido
As amostras bacterianas são categorizadas em sensíveis, resistentes ou intermediárias. Na maioria das situações clínicas, o teste qualitativo é suficiente para orientar a escolha terapêutica, mas em algumas situações, é necessário quantificar a suscetibilidade (sensibilidade ou resistência), isto é, fazer a detecção da CIM. Neste caso, será necessário recorrer a um método quantitativo.
A realização de um controle de qualidade rigoroso é obrigatória, considerando-se que um grande número de variáveis pode afetar o teste de disco-difusão. Dentre estas variáveis destacam-se:
O preparo dos meios de cultura;
O controle do ph do meio;
A espessura do ágar na placa;
O tempo de armazenamento das placas;
A temperatura e a atmosfera de incubação;
A concentração do inóculo;
O estoque adequado dos discos de suscetibilidade;
O rigor na execução da técnica.
PROCEDIMENTO
Embeber um swab estéril na suspensão bacteriana, comprimindo-o contra as paredes do tubo para tirar o excesso da suspensão, e semear em seguida de forma suave em todas as direções na placa, procurando abranger toda a superfície.
Com auxílio de uma pinça flambada e resfriada, colocamos os monodiscos, sobre a superfície do meio inoculado, exercendo uma leve