Relatório método biureto
1. Objectivo:
Este procedimento experimental tem como objetivo a determinação da concentração de proteínas no plasma humano pelo Método de Biureto.
2. Resultados
Tabela 1 – Soluções preparadas em tubos de ensaio de 15 ml. Tubo | Proteína (mg) | Albumina 0.4% (ml) | Água (ml) | Reagente Biureto (ml) | Plasma diluído 10x (ml) | 1 | 0 | __ | 2.0 | 4.0 | __ | 2 | 2 | 0.5 | 1.5 | 4.0 | __ | 3 | 4 | 1.0 | 1.0 | 4.0 | __ | 4 | 8 | 2.0 | __ | 4.0 | __ | 5 | __ | __ | 1.5 | 4.0 | 0.5 | 6 | __ | __ | 1.5 | 4.0 | 0.5 |
Tabela 2 – Valores da Absorvência registada em cada tubo. Tubos | Abs (λ=540 nm) | 1 | 0,000 | 2 | 0,0498 | 3 | 0,1499 | 4 | 0,3208 | 5 | 0,1442 | 6 | 0,1322 |
Construir a curva de calibração e determinar a quantidade de proteína presente nos tubos de ensaio que contêm amostra.
(em anexo)
3. Cálculos efetuados
Cálculo experimental da concentração de proteínas no plasma humano (mg/ml) (tendo em conta o factor diluição). | Quantidade de proteína nos tubos contendo plasma (tubo 5 e tubo 6):0,1442+0,13222 = 0,1382Coordenada y (absorvência) = 0,1382 Coordenada x (proteína) ≃ 3,62 mgA = 3,62×100,5 = 72,4 mg/ml |
Converta a concentração de proteínas obtida em percentagem (% (g/100 ml)) | 3,62 mg = 3,62 x 10-3 g0,5 mlA = (3,62×10-3)×100,5 = 7,24 x 10-2 g/mlA = (7,24 x 10-2) x 100 = 7,24% |
4. Discussão dos resultados
Discuta o resultado obtido, comparando-o com os valores considerados normais, indicados na literatura: 5-7As % (normal). | O método do Biureto é um método eficaz para a determinação da concentração de uma proteína. Considerando o valor obtido para a concentração de proteínas no plasma humano (7,24%) podemos verificar que este não se encontra dentro dos valores de referência (5% a 7%). Tal acontecimento pode derivar de alguns erros experimentais e também se deve ter em atenção que existem