relatório dosagem de Amilase
1. Objetivo:
Determinar a concentração de amilase no soro, utilizando a espectrofotometria.
2. Procedimentos:
Foram identificados dois tubos de ensaio, o tubo Teste (T) e o tubo Controle (C), foi adicionado 1,0 mL de substrato de amido em cada um dos tubos, foi colocado em seguida em banho-maria a 37°C por dois minutos. Adicionou-se 20µL do soro (amostra) no tubo T, a solução foi agitada e colocada para incubação em banho-maria a 37°C por exatamente 7 minutos e 30 segundos. Logo em seguida, foi adicionado 1,0mL da solução de iodo no tubo T e no tubo C, depois adicionou 8,0mL de água destilada em ambos os tubos. Em seguida foi feita a leitura da absorbância das soluções dos tubos Teste e Controle em 660nm, zerando o espectrofotômetro com um branco de água destilada.
3. Cálculos:
As absorbâncias encontradas foram: Controle (C) = 0,342 e Teste (T) = 0,115
Para os devidos cálculos, utilizou-se da fórmula:
4. Resultados:
Através dos cálculos realizados, obteve-se o valor de 531 U/dL, aproximadamente, de amilase na amostra. Os valores de referência para amilase são de: 60 a 160 Unidades/dL, assim, a amostra apresentou uma alta elevação do teor de amilase no soro.
5. Discussões: Algumas disfunções patológicas no pâncreas e nas parótidas podem ser investigadas pela concentração de amilase no soro, como foi feito anteriormente. A amilase é uma enzima produzida pelo pâncreas bem como pelas glândulas salivares. Atua na digestão do amido e do glicogênio contidos nos alimentos. A amilase catalisa a hidrolise do amido liberando moléculas de açúcares e dextrina. A amostra foi incubada com um substrato de amido. Na presença de iodo a solução torna-se azulada devido ao amido não hidrolisado do substrato, a coloração azul diminui proporcionalmente à medida que a molécula de amido é hidrolisada pela amilase e esta é calculada em comparação com o controle. A concentração de amilase encontrada no soro foi de