Relatório de bioquímica- proteínas

relatório de bioquímica- proteínas

1- INTRODUÇÃO

Para se identificar e dosar as proteínas há vários métodos, com suas respectivas características, vantagens e restrições.
a) Identificação de proteínas pelo método de Biureto – Esta reação ocorre quando há dois ou mais laços peptídicos em meio fortemente alcalino a solução diluída de cobre produz cor azul-violeta. Esta cor se deve a formação de complexos de coordenação entre o íon cúprico e quatro grupos amina de duas cadeias protéicas adjacentes.
b) Identificação de aminoácidos pelo método da Ninhidrina – Essa reação ocorre pela presença do amino grupo livre e possibilita a determinação quantitativa do aminoácido. A ninhidrina é um agente oxidante poderoso que causa a descarboxilação oxidativa dos aminoácidos produzindo CO2, NH3 e um aldeído com um átomo de carbono a menos. A ninhidrina reduzida reage com a amônia liberada formando um complexo de cor violeta (a leitura máxima ocorre em 570nm).
c) Efeitos desnaturantes: (temperatura, ácidos e bases fortes) Ë uma mudança estrutural e funcional da proteína original sem alteração na seqüência dos aminoácidos. O efeito da temperatura promove a destruição de pontes de hidrogênio e interações hidrofóbicas que leva ao desnovelamento da molécula. O efeito do ácido leva a alteração da carga líquida da proteína. Valores alterados de pH onde haja excesso de carga positiva ou negativa concorrem para desestabilizar a estrutura compacta da proteína. É importante ressaltar que a conformação nativa das proteínas é estável somente numa faixa estreita de valores de pH.
d) Precipitação das proteínas com soluções salinas (Salting-out): baseia-se na formação de um sal com as proteínas em solução que se encontra na forma iônica e um ânion ou cátion inorgânico adicionado na forma de sal. Na técnica usada nesta prática o ácido fosfotungstíco (Na2WO4. H2O + H2SO4) tem função aniônica onde a proteína atua como cátion. Essa precipitação é feita em meio ácido em relação ao pI da