Relatório de aula prática sobre coloração de Gram

COLORAÇÃO DE GRAM

1. INTRODUÇÃO
A Coloração de Gram é uma técnica de coloração para diferenciar os micro-organismos com diferentes estruturas de parede celular a partir das colorações que estas adquirem após tratamento com agentes químicos das cores, para serem observados em microscópio óptico.
São as diferenças da estrutura da parede bacteriana, principalmente com relação à espessura da camada de peptideoglicano, que será responsável pelo diferente comportamento das bactérias diante da coloração de Gram.
Através da coloração de Gram diferencia-se bactérias Gram positivas das bactérias Gram negativas.

2. MATERIAL UTILIZADO

Amostra Staphylococcus aureus
Amostra Echerichia coli
Cronometro
Microscópio
Laminas de ponta fosca
Alça de Platina
Bico de Bulsen
Pinça
Pipeta com água Biodestilada

3. SOLUÇÕES

Corante Cristal Violeta
Corante Fucsina
Lugol
Álcool cetona
Água corrente
4. OBJETIVO

Tivemos como objetivo um desafio apresentado pelo professor, onde a coloração de gram. foi realizada de forma invertida. De modo que pudéssemos analisar os patógenos comparando os resultados.

5. METODOLOGIA

Limpar a bancada com álcool 70%
Ascender a chama do Bico de Bulsen, para criar um campo estéril
Organização da bancada de forma que facilite o manuseio e não ocorra contaminação
Identificação das laminas a lápis
Adicionar uma gota de água biodestilada no centro da lamina
Flambar a alça de Platina
Fixar o material na lamina, utilizando o Bico de Bulsen, repetindo o procedimento até a secagem completa.
Utilizar a pinça para auxilio na coloração

6. PROCEDIMENTO COLORAÇÃO DE GRAM

Distribuir o corante Cristal Violeta em toda lamina;
Aguardar 1 minuto;
Lavar indiretamente em água corrente;
Distribuir a solução Lugol na lamina;
Aguardar 1 minuto;
Lavar indiretamente em água corrente;
Adicionar álcool cetona em toda lamina;
Aguardar de 20 á 30 segundos;
Lavar indiretamente em água corrente;
Adicionar o corante Fucsina em toda